胰岛素样生长因子1基因转染兔脂肪间质干细胞的增殖

• 作者: 原泉 安春厚 李建军 程扬
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 脂肪间质干细胞 胰岛素样生长因子1 基因转染 细胞周期
• 年，卷（期）: 2009,（23）
• 所属期刊栏目: 干细胞转基因表达
• 页码范围: 4433-4436
• 页数: 4页
• 分类号: R394.2
• 字数: 4174字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2009.23.005

摘要

背景:基因工程是目前软骨修复的主要方法,脂肪间质干细胞以其来源丰富、取材容易、免疫相容性良好、体外培养可以较长时间保持分化表型、有较强的向软骨细胞转化的能力而成为理想的种子细胞.目的:探讨胰岛素样生长因子1基因转染对兔脂肪间质干细胞增殖的影响.设计、时间及地点:细胞学基因转染体外观察,于2006-03/2007-03在中国医科大学细胞生物实验室完成.材料:成年新西兰大白兔3只,由中国医科大学实验动物中心提供.含有全长人胰岛素样生长因子1 cDNA片段的质粒pcDNA3.1-hIGF-1由吉林大学徐莘香教授惠赠.方法:取兔颈后皮下脂肪,Ⅰ型胶原酶消化法体外分离培养兔脂肪间质干细胞.取传至第2代细胞,以0.5× 106/孔密度接种于6孔板,细胞融合至90%～95%时随机分为未转染组、转染空载体pcDNA3.1组、转染质粒pcDNA3.1-hIGF-1组,采用脂质体介导基因转染法进行质粒pcDNA3.1-IGF-1转染,经G418筛选后培养4周.主要观察指标:采用RT-PCR及Western blot方法检测胰岛素样生长因子1的表达情况,MTT法及流式细胞仪检测细胞增殖情况.结果:转染pcDNA3.1-hIGF-1组的脂肪间质干细胞内有大量胰岛素样生长因子1 mRNA及蛋白表达,未转染组及转染空载体pcDNA3.1组无表达.细胞增殖曲线显示,转染质粒pcDNA3.1-hIGF-1组的脂肪间质干细胞增殖速度较其他2组细胞明显加快.流式细胞仪检测显示,转染质粒pcDNA3.1-hIGF-1组的脂肪间质干细胞较其他2组细胞的S期比例显著增加(P<0.05),G1期比例显著下降(P＜0.05).结论:质粒pcDNA3.1-IGF-1转染兔脂肪间质干细胞后,可以获得稳定表达,并能明显促进脂肪间质干细胞的增殖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李建军	中国医科大学附属盛京医院骨科	92	475	11.0	16.0
2	安春厚	中国医科大学附属盛京医院骨科	20	85	4.0	8.0
3	原泉	中国医科大学附属盛京医院骨科	34	184	8.0	12.0
4	程扬	中国医科大学附属盛京医院骨科	2	5	2.0	2.0