壳聚糖季铵盐作为基因递送载体的初步研究

• 作者: 何卓晶 洪艳 钟婧 陶薇
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 壳聚糖季铵盐 基因治疗 基因载体
• 年，卷（期）: 2009,（12）
• 所属期刊栏目: 控制释放载体材料
• 页码范围: 2373-2377
• 页数: 5页
• 分类号: R318
• 字数: 5641字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2009.12.040

摘要

背景:非病毒载体因其安全性好而在基因治疗领域赢得了广泛的关注,各种各样的非病毒载体处在不断的研究中,壳聚糖季铵盐作为一种新的生物材料,同样也具有作为基因递送载体的潜质.目的:考察壳聚糖季铵盐体外基因转染活性,寻求一种新的非病毒基因载体递送系统.设计、时间及单位:对比观察实验,于2008-04/12在浙江省医学科学院生物工程所完成.材料:质粒pcDNA3.1-EGFP为浙江省医学科学院生物工程实验室保存.以3-氯-2-羟丙基三甲基氯化铵作为改性剂制备壳聚糖季铵盐,用复凝聚法制备载基因纳米粒.方法:凝胶阻滞实验分析壳聚糖季铵盐包裹质粒的能力,DNase Ⅰ的保护实验分析载基因纳米粒的抵抗核酸酶降解的能力,体外基因转染实验评价纳米粒的体外转染活性,用倒置荧光显微镜观察和流式细胞仪测定转染结果.通过考察转染液中有无牛血清和递送不同剂量的基因对转染效率的影响,寻求本递送系统较好的转染条件.另外,用MTT法测定壳聚糖季铵盐的细胞毒性.主要观察指标:壳聚糖季铵盐和pcDNA 3.1-EGFP以何种比例结合形成的纳米粒、转染液中有无牛血清,质粒的量为多少时对人胚肾T细胞的转染效率足最高的;不同浓度的壳聚糖季铵盐对细胞生长的影响.结果:壳聚糖季钱盐纳米粒能转入人胚肾T细胞,虽然转染效率略逊丁聚乙烯亚胺,但是细胞毒性明显小于聚乙烯亚胺.壳聚糖季铵盐纳米粒转染细胞72 h后效率较高,经综合分析,当pcDNA质量为2 μg,壳聚糖季铵盐和pcDNA以质量比为5结合形成的纳米粒,在无血清条件下对人胚肾T细胞进行转染,转染效率足最高的.结论:壳聚糖季铵盐纳米粒能将基因递送到细胞内,并且报告基因能在细胞内表达.因此,壳聚糖季铵盐用做基因递送的载体系统值得进一步的研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陶薇	浙江省医学科学院生物工程所	14	32	2.0	5.0
2	洪艳	浙江省医学科学院生物工程所	49	197	8.0	13.0
3	何卓晶	浙江省医学科学院生物工程所	13	33	2.0	5.0
4	钟婧	浙江省医学科学院生物工程所	4	56	3.0	4.0