荧光标记寡核苷酸的反相离子对色谱分析

• 作者: 傅博强 武利庆 王晶 盛灵慧 高运华 黎朋
• 来源期刊: 分析化学
• 学科: 化学
• 关键词: 荧光标记寡核苷酸 荧光染料 反相离子对色谱 保留
• 年，卷（期）: 2009,（12）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1722-1726
• 页数: 5页
• 分类号: O6
• 字数: 4360字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0253-3820.2009.12.003

摘要

建立荧光标记寡核苷酸反相离子对色谱分析方法,优化了流动相醋酸三乙胺浓度(0～0.15 mol/L), pH 4.5～7.0和洗脱强度等色谱条件.对5-mer, 10-mer和15-mer非标记和5'-羧基荧光素(5'FAM)标记寡核苷酸的保留进行比较分析,研究荧光标记寡核苷酸的保留机理,并分离TaqMan~(TM)探针等多种常用荧光标记寡核苷酸.结果显示,不同长度荧光标记寡核苷酸在0.01 mol/L醋酸三乙胺,pH 7.0的条件下获得最大分离.荧光标记寡核苷酸的保留与非标记寡核苷酸有明显差异,两者可完全分离.在一定长度范围内非标记寡核苷酸随长度的增加,保留时间增长;相反,荧光标记寡核苷酸的长度增加,保留时间减短.荧光染料疏水性对其标记的寡核苷酸在反相柱中的保留有较大影响,荧光染料疏水性越强,其标记寡核苷酸保留时间越长.但疏水性的影响程度随标记寡核苷酸长度增加而逐渐变小.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	武利庆		38	119	5.0	9.0
2	王晶		107	406	10.0	15.0
3	高运华		24	92	5.0	9.0
4	盛灵慧		23	138	6.0	11.0
5	黎朋		9	21	3.0	4.0
6	傅博强		24	74	5.0	7.0