定量PCR检测乙肝病毒DNA实验中变性温度和时间的影响

• 作者: 刘宝林 华泽钊 程远霞 陈颖 鲍彩丽
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 聚合酶链反应 乙型肝炎病毒 变性温度 变性时间
• 年，卷（期）: 2009,（23）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 3529-3531,3536
• 页数: 4页
• 分类号: R512.62|R446.5
• 字数: 2873字
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨PCR仪温度特性及变性温度、变性时间对实时荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒的影响.方法 分析比较变性温度范围为88℃-97℃,变性时间分别为5 s和40 s,退火和延伸60℃,40 s,循环数40的实时荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒的效果.结果 变性温度超过97℃或者变性时间超过40 s.检测到的DNA的量明显降低;变性时间小于20 s,模板含量较低的样本难以检出.结论 变性初期或退火初期PCK温度与程序设置温度偏差较大;变性时间不应超过95℃,否则,检测到的DNA数量将显著降低;变性时间不应小于20 s或超过40 s,否则容易导致假阴性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	华泽钊	上海理工大学低温生物研究所	229	2478	25.0	35.0
2	刘宝林	上海理工大学低温生物研究所	337	1862	19.0	27.0
3	程远霞	上海理工大学低温生物研究所	8	43	2.0	6.0
4	陈颖		7	67	4.0	7.0
5	鲍彩丽		2	7	1.0	2.0