纳米羟基磷灰石颗粒能够影响大鼠腹腔单核巨噬细胞的凋亡吗?

• 作者: 丁婷婷 孙皎
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 纳米羟基磷灰石 颗粒 凋亡 P53
• 年，卷（期）: 2009,（51）
• 所属期刊栏目: 研究与报告
• 页码范围: 10093-10096
• 页数: 4页
• 分类号: R318
• 字数: 4643字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2009.51.018

摘要

背景:由于尺寸效应,纳米颗粒可以结合细胞内大分子从而引起细胞坏死或凋亡.针对纳米颗粒的生物安全性,目前缺乏对颗粒致细胞凋亡的机制分析.目的:从细胞及分子水平,探讨纳米羟基磷灰石颗粒对大鼠腹腔单核巨噬细胞凋亡的影响.设计、时间及地点:材料-细胞学体外观察,于2007-01/2008-12在上海生物材料研究测试中心完成.材料:2级SD雄性大鼠购自上海西普尔-必凯实验动物有限公司,纳米颗粒由中科院硅酸盐所提供.方法:无菌条件下吸取大鼠腹腔液,贴壁法体外分离培养单核巨噬细胞,调整细胞浓度为2×10～9L～(-1).在300 W/40 kHz超声条件下制备含20,100,200 mg/L.纳米羟基磷灰石颗粒的悬浮液,分别诱导单核巨噬细胞24 h,并设立正常对照组.主要观察指标:应用透射电镜观察细胞超微结构表征;AnnexinV-EGFP/PI双染检测细胞凋亡率;Western Blot法检测凋亡调控相关基因P53的表达变化.结果:正常对照组单核巨噬细胞伪足完整、核膜正常、核质均匀;20,100,200 mg/L 纳米羟基磷灰石诱导24 h后,单核巨噬细胞具有典型的凋亡形态学特征.与正常对照组比较,20,100 mg/L纳米羟基磷灰石诱导后细胞凋亡率均显著升高(P<0.01),且100mg/L.诱导组升高幅度明显大于20 mg/L.组(P<0.05).正常对照组单核巨噬细胞中几乎不表达P53蛋白;经不同质量浓度的纳米羟基磷灰石诱导后,单核巨噬细胞P53蛋白的表达均明显增高,且蛋白的表达与纳米颗粒的质量浓度呈正相关.结论:纳米羟基磷灰石颗粒能够通过蛋白磷酸化上调P53蛋白的表达,从而启动下游相关基因,最终导致细胞凋亡.