鸡蛋主要过敏原Gal d 3基因的克降、表达、纯化及免疫学鉴定

• 作者: 刘志刚 吴序栎 吴海强 杨志华
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 工学
• 关键词: 鸡蛋 过敏原 基因克隆 表达 Gald3
• 年，卷（期）: 2009,（1）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 142-146
• 页数: 5页
• 分类号: Q785|TS201.6|TS253.1
• 字数: 4342字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1002-6630.2009.01.034

摘要

目的:克隆表达鸡蛋主要过敏原Gal d 3基因并柃验其免疫活性.方法:提取鸡蛋的总RNA,采用RT-PCR方法扩增出目的基因片段,将其克隆入T载体中进行测序和分析.设计带有酶切位点的特异性引物,采用RT-PCR获得整个短的开放阅读框并将目的基因克隆到大肠杆菌表达载体pET-28a中进行诱导表达.通过Ni2+亲和层析柱对重组蛋白进行纯化,采用免疫印迹(Western blotting)方法检测其IgE结合活性.结果:克隆获得了鸡蛋主要过敏原Gal d 3.基因开放阅读框为2118个碱基(包括终止密码子),编码705个氨基酸.该序列编码的蛋白等电点为6.5,相对分子质量约为76000.表达产物经亲和层析纯化,用Western blotting方法检测免疫学活性,目的蛋白具有良好的免疫原性.结论:成功地克隆和表达了鸡蛋主要变应原Gal d 3基因,该蛋白具有良好的免疫原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘志刚	深圳大学过敏反应与免疫学研究所	324	1724	17.0	23.0
2	吴海强	深圳大学过敏反应与免疫学研究所	27	181	9.0	12.0
3	吴序栎	深圳大学过敏反应与免疫学研究所	30	85	6.0	8.0
4	杨志华	深圳大学过敏反应与免疫学研究所	2	16	1.0	2.0