无血清悬浮培养肾癌干细胞表面标志CD133及端粒酶活性的表达

• 作者: 周留正 孙浩 潘鹏 田福起 郭涛 马克钧
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 肿瘤干细胞 肾癌 端粒酶 活性 CD133
• 年，卷（期）: 2009,（27）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 5286-5290
• 页数: 5页
• 分类号: R394.2
• 字数: 5113字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2009.27.017

摘要

背景:有研究表明端粒酶活性抑制剂不仅能抑制或杀死肾癌细胞,而且对决定肾癌发生发展的干细胞也有作用.目的:观察无血清悬浮培养的肾癌干细胞表面标志CD133及端粒酶活性的表达情况,并与含血清培养的肾癌细胞作比较.设计、时间及地点:细胞学体外观察,于2008-0612009-02在江苏大学完成.材料:手术切除肾癌周围新鲜的正常肾组织标本由江苏大学附属医院提供,肾癌干细胞株OS-RC-2由上海中科院细胞库提供.方法:取处于对数生长期的肾癌干细胞OS-RC-2,胰酶消化后离心弃上清,悬浮于含EGF、bFGF的DMEM,F12无血清培养基中,调整细胞浓度为2×105L-1进行接种,在37℃、体积分数为5%的CO2培养箱中悬浮培养.以含血清培养的肾癌细胞及正常肾组织细胞作为对照.主要观察指标:倒置显微镜下观察细胞生长情况,流式细胞仪检测肾癌干细胞CD133及CD34的表达,采用TRAP实时定量检测肾癌干细胞端粒酶活性.结果:肾癌干细胞接种于无血清培养基后,细胞呈圆形悬浮于培养液中:2 d后有细胞球生成,每个细胞球含3～8个细胞,折光性较强;7 d后细胞球明显增多,体积增大,为规则的圆形或卵圆形.无血清悬浮培养的肾癌干细胞球CD133+CD34-率明显高于含血清培养的肾癌细胞CD133+CD34-率,正常肾组织细胞未测出有CD133及CD34的表达,3者间比较差异有显著性意义(F=328.25,P<0.05).肾癌干细胞球和肾癌细胞端粒酶活性均高于正常肾组织细胞(F=278.74,P<0.05),而前2者间端粒酶活性无明显差异.结论:与含血清培养的肾癌细胞相比,无血清悬浮培养的肾癌干细胞表面标志CD133呈明显高表达,二者端粒酶活性均高于正常肾组织.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭涛	江苏大学附属医院泌尿外科	27	204	7.0	13.0
2	孙浩	江苏大学附属医院泌尿外科	62	130	6.0	7.0
3	潘鹏	江苏大学附属医院泌尿外科	22	75	4.0	7.0
4	马克钧	江苏大学附属医院泌尿外科	17	32	3.0	4.0
5	周留正	江苏大学附属医院泌尿外科	28	95	6.0	8.0
6	田福起	江苏大学附属医院泌尿外科	7	21	3.0	4.0