摘要:
背景:大分子修饰的金纳米粒子可被应用于治疗学或诊断学等其他方面,但是大多数报道多限于制备蛋白质、DNA及小分子糖修饰的金纳米粒子方面,对于制备多糖修饰的金纳米粒子的研究尚不深入.目的:制备一种肝素修饰的金纳米粒子,考察工艺条件片对其粒径及紫外吸收光谱进行观察.设计、时间及地点:对比观察实验,于2007-04/2008-09在武汉理工大学化工学院生物技术制药实验室完成.材料:制备金纳米粒子并在4℃保存供实验用.方法:将肝素钠用亚硝酸降解法降解,得到还原末端为醛基的肝素,分别溶解于二甲亚砜、含0.05 mL,0.5 mL冰醋酸的二甲亚砜溶液,再与对巯基苯胺发生还原胺化反应,用氰基硼氢化钠作还原剂,得到带巯基的肝素衍生物.另取样品溶解于4支含0.5mL冰醋酸的二甲亚砜溶液的瓶内,再加入对巯基苯胺和氰基硼氢化钠,分别反应2,4,6,24 h.将得到的肝素衍生物加入到制备好的金纳米粒子溶液中,肝素以Au-S化学键合的方式定向固定在金纳米粒子的表面.主要观察指标:①肝素修饰前后金纳米粒子的紫外光谱最大吸收波长.②肝素修饰前后金纳米粒子的粒径大小.结果:制备金纳米粒子时,当柠檬酸钠和氯金酸物质的量比为6∶1时,纳米粒子粒径均一.通过还原胺化反应制各端基为巯基的肝素时,加入冰醋酸的量越多,反应产率越高.反应6 h内.反应时间越长,其反应产率越高,24 h的反应产率虽比6 h的略有提高,但差别不大,说明6 h反应已经基本完全.将肝素以Au-S化学键合的方式定向固定在金纳米粒子的表面,金纳米粒子的粒径为10 nm,紫外最大吸收为522 nm;肝素修饰的金纳米粒子的粒径为20 nm,紫外最大吸收为529 nm.结论:制备了粒径均一的肝素修饰的金纳米粒子,并且粒径大小对纳米粒子的紫外最大吸收有影响.还原胺化反应的最佳反应条件是采用浓度比为8∶1的二甲亚砜/冰醋酸混合溶液作为溶剂,反应时间为6 h.