视神经星状胶质细胞的培养

• 作者: 刘玉琴 张宏 张永鹏 王春景 苏小玲 董继红 顾蓓
• 来源期刊: 中国当代医药
• 学科: 医学
• 关键词: 星状胶质细胞 GAFP 大鼠
• 年，卷（期）: 2009,（10）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 33-35
• 页数: 3页
• 分类号: R329.2+4
• 字数: 2343字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-4721.2009.10.018

摘要

目的:探索建立视神经星状胶质细胞培养的最佳方法,观察该细胞体外水解酶表达情况.方法:分别取不同年龄WISTAR大鼠(出生4 d、7 d、成年)的视神经,利用胰蛋白酶加EDTA、胶原酶、木瓜酶、胰蛋白酶加胶原酶等不同方法消化,分别接种在0.2%明胶、鼠尾胶、多聚赖氨酸包被的培养瓶中,进行原代培养,观察细胞生长状况.利用免疫组化鉴定分离培养的细胞.连续传代观察其衰老情况.利用水解空斑法观察其水解酶表达.结果:几种方法均可见细胞生长,年龄4、7 d大鼠视神经要比成年大鼠视神经胶质细胞培养成功率高,利用胰蛋白酶与胶原酶混合消化要比其他消化方法细胞损失小,速度快,细胞成活率高.培养细胞呈典型星状胶质细胞形态,GAFP呈阳件.常规3 d传代一次,可传代40次.胶质细胞在蛋白膜上可形成明显的水解空斑.结论:利用胰蛋白酶与胶原酶混合消化法,从新生鼠取材,可成功培养视神经星状胶质细胞,体外可传代40代.该细胞在体外町分泌蛋白水解酶.