反义基质金属蛋白酶2基因影响人增殖期血管瘤的体内实验

• 作者: 于蓉 刘勇 岑瑛 曾凡伟 李正勇 王怀胜 许学文
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 增殖期血管瘤 血管新生 基因治疗 基质金属蛋白酶2
• 年，卷（期）: 2009,（20）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 3821-3828
• 页数: 8页
• 分类号: R349.83
• 字数: 1683字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2009.20.003

摘要

背景:研究表明,通过转染反义基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)基因抑制增殖期血管瘤组织中MMP-2的分泌将成为增殖期血管瘤治疗的重要手段.目的:观察反义MMP-2cDNA基因感染对人增殖期血管瘤裸小鼠移植瘤生长的影响.设计、时间及地点:随机分组设计,对比观察.实验于2003-08/2004-09在四川大学华西临床医学院完成.材料:BALB/c-nu/nu裸小鼠(简称为裸鼠)18只,体质量20 g左右;取1名出生52 d女性患儿左胸壁的海绵状血管瘤,病理诊断证实为增殖期血管瘤.方法:将手术切除的人增殖期血管瘤新鲜标本切分为5mm×4mm×3mm小块,于1 h内移植于18只裸小鼠双侧腋部皮下,制备荷瘤裸小鼠血管瘤移植模型.将移植瘤块成活后(46 d)15只操鼠进行分组治疗,Ad-GFP 组,Ad-aMMP-2组分别沿肿瘤长径多方向瘤内注射重组腺病毒液Ad-GFP和Ad-aMMP-2,对照组注射等量的PBS,每组5只.隔日值内注射1次,共注射4次.主要观察指标:①大体观察肿瘤体积的变化及各组裸鼠肿瘤块坏死面积的比较.②绿色荧光蛋白在备组裸鼠体内的表达.③肿瘤组织形态学变化(大体、苏术精-伊红染色及透射电镜观察).④免疫组织化学检测MMP-2eDNA基因及微血管密度的表达.⑤流式细胞仪检测肿瘤细胞的生长周期和凋亡.结果:①Ad-aMMP-2能抑制体内血管瘤的生长,没有观察到明显的毒副作用.3组肿瘤均有不同程度的坏死,其中Ad-aMMP-2组面积坏死率明显高于对照组和Ad-GFP组(P<0.01).②组织学切片可见Ad-GFP组绿色荧光蛋白基因的表达.⑨大体观察对照组和Ad-GFP组瘤组织大:Ad-aMMP-2组瘤组织相对较小.苏木精一伊红染色可见对照组和Ad-GFP组内皮细胞密集,细胞呈条索状或团块状排列: Ad-aMMP-2组肿增有多处出血和凝同性的片状坏死灶.透射电镜观察对组血管内皮细胞形态正常:Ad-GFP组瘤细胞大,核仁明显;Ad-aMMP-2组部分血管内皮细胞核内染色质固缩,聚积成团块状形成凋亡小体.④Ad-aMMP-2组MMP-2和微血管密度较对照组和Ad-GFP组明显下降(P<0.05).⑤Ad-aMMP-2组G0/G1期百分率大于其他两组(p<0.05),增殖指数降低:Ad-aMMP-2组细胞凋亡率大于对照组和Ad-GFP组(P<0.05),凋指数明显增加.结论:通过反义MMP-2基因阻断人增殖期血管瘤的屯长是可行的,其机制主要是通过抑制血管内皮细胞分泌MMP-2导致局部缺血起作用的.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘勇	四川大学华西医院垫形外科	113	795	15.0	23.0
2	岑瑛	四川大学华西医院垫形外科	220	895	14.0	19.0
3	王怀胜	四川大学华西医院垫形外科	31	102	6.0	9.0
4	曾凡伟	四川省达州市中心医院骨科	12	12	2.0	3.0
6	许学文	四川大学华西医院垫形外科	43	210	8.0	12.0
7	李正勇	四川大学华西医院垫形外科	30	94	5.0	8.0
8	于蓉	四川大学华西医院垫形外科	18	61	4.0	7.0