Taqman MGB PCR定量检测水产品中沙门氏菌的方法建立

• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 工学
• 关键词: 实时荧光PCR 定量检测 沙门氏菌 fimY基因 TaqmanMGB探针 水产品
• 年，卷（期）: 2009,（20）
• 所属期刊栏目: 分析检测
• 页码范围: 303-307
• 页数: 5页
• 分类号: TS254.1
• 字数: 3560字
• 语种: 中文

摘要

建立采用Taqman MGB实时荧光PCR法快速定量检测水产品中沙门氏菌.根据沙门氏菌fimY基因保守序列,设计引物和Taqman MGB探针,建立Taqman MGB实时PCR定量检测体系.采用本方法对24株共14种血清型沙门氏菌和17株与沙门氏菌亲缘关系比较近,以及在样品中能同时存在的常见食源性致病菌菌株进行PCR扩增.结果显示:所有的沙门氏菌菌株结果均为阳性,而非沙门氏菌菌株检测结果均为阴性,反应特异性为100%.本方法的纯菌最低检测低限为13CFU/ml,样品江瑶贝和蚬子肉中添加肠炎沙门氏菌的最低检测低限为130CFU/ml;香螺肉中添加肠炎沙门氏菌的最低检测低限为1300CFU/ml.定量关系式为y=-3.3814181nx+45.115715,R~2=0.964878.整个实验2h即可完成,可应用于水产品中沙门氏菌污染状况调查及快速检测.