全骨髓贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞及其诱导分化

• 作者: 朱绍兴 苏一鸣 蔡鹏 黄世勇
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 间充质干细胞 骨髓 生物学特性 分化
• 年，卷（期）: 2009,（36）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 7073-7077
• 页数: 5页
• 分类号: R394.2
• 字数: 5603字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2009.36.014

摘要

背景:骨髓中的间充质干细胞含量极少,每1×104～1×105个单核细胞中约有1个骨髓间充质干细胞,需要在体外分离、纯化、扩增后才能满足体内移植要求.目的:观察体外分离培养的骨髓间充质干细胞生物学特性及多向分化潜能.设计、时间及地点;细胞学体外观察,于2007-10/2008-12在福建医科大学附属协和医院泌尿外科研究室完成.材料:清洁级雄性近交系SD大鼠30只,由上海斯莱克实验动物有限公司提供.方法:通过全骨髓贴壁法体外分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,待细胞融合至80%～90%胰蛋白酶消化传代.取传至第3代细胞,分别向成骨、成脂方向诱导分化.主要观察指标:倒置相差显微镜下观察细胞形态,流式细胞仪检测其表面标记,茜素红染色检测其成骨能力,油红O染色检测其成脂能力.结果:原代及传代的骨髓间充质干细胞均呈长梭形成纤维细胞样,连续传代10代以上,细胞始终保持旺盛的生长及扩增能力.第3代骨髓间充质干细胞CD90,CD44,CDl06均呈阳性表达,而CD34,CD45,CD11b呈阴性.成骨诱导21 d后,可见大量橘红色矿化结节形成.成脂诱导2周后,可见细胞的胞浆内出现大量红染脂滴. 结论:全骨髓贴壁培养法可大量分离纯化、扩增骨髓间充质干细胞,所获细胞具有间充质干细胞的一般生物学特性,经诱导培养后具有多向分化潜能.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱绍兴	福建医科大学附属协和医院泌尿外科	49	199	8.0	11.0
2	黄世勇	福建医科大学附属协和医院泌尿外科	5	54	3.0	5.0
3	苏一鸣	福建医科大学附属协和医院泌尿外科	11	53	3.0	7.0
4	蔡鹏	福建医科大学附属协和医院泌尿外科	5	47	2.0	5.0