基于人脂肪组织获取基因构建pET28a-leplin(瘦素)重组子

• 作者: 单磊 巫国辉 文辉才 柳大烈
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 瘦素 重组 脂肪
• 年，卷（期）: 2009,（7）
• 所属期刊栏目: 组织构建相关基础实验
• 页码范围: 1317-1319
• 页数: 3页
• 分类号: R394.36
• 字数: 3390字
• 语种: 中文

摘要

背景:新近的一些研究认为,采用体外重组瘦素替代疗法对遗传性肥胖、难愈性创面和内源性瘦素缺乏应是行之有效的方法.目的:取人脂肪组织获取瘦素基因,构建pET28a-leptin重组子.设计、时间及地点:单一样奉观察,实验于2004-06/2007-12在江西省医学科学研究所抗肿瘤室完成.材料:取自22岁汉族女性行重睑于术时皮下脂肪组织,冻存于液氮中备用,供者知情同意.方法:取人脂肪组织,反转录-聚合酶链反应得到瘦素基因后,通过DNA重组技术克隆至pMDl8T载体与pET28a原核表达载体,EcoR Ⅰ+Xho Ⅰ双酶切及测序鉴定.主要观察指标:①cDNA扩增结果.②重组质粒鉴定.③DNA测序结果.结果:扩增得到520 bp目的基因;所构建重组瘦素原核表达载体pET28a-leptin经双酶切电泳见520 bp目的条带,DNA测序与相应基因序列同源性达100%.结论:通过DNA重组至pET28a原核表达载体,经EcoR Ⅰ+Xho Ⅰ双酶切及测序鉴定成功构建pET28a-leptin重组子.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	柳大烈	南方医科大学珠江医院整形外科	177	1288	16.0	25.0
2	单磊	南方医科大学珠江医院整形外科	30	164	7.0	11.0
3	巫国辉	江西省人民医院整形颌面外科	41	187	8.0	11.0
4	文辉才	南方医科大学珠江医院整形外科	6	30	3.0	5.0