晚期氧化蛋白产物的制备及纯化

• 作者: 余荣杰 吴雄飞 易维京 田梅
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 晚期氧化蛋白产物 纯化 凝胶层析 人血白蛋白
• 年，卷（期）: 2009,（28）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 5544-5548
• 页数: 5页
• 分类号: R318
• 字数: 5011字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2009.28.030

摘要

背景:晚期氧化蛋白产物是血液透析患者免疫功能紊乱、加速性动脉粥样硬化、透析相关性淀粉样变等长期并发症的重要致病环节.但是对于晚期氧化蛋白产物的基础性研究相对较少.主要原因之一就是不能获得高纯度且具有生物学活性的晚期氧化蛋白产物.目的:制备及纯化晚期氧化蛋白产物,并对其进行鉴定,以寻求一种制备高纯度且具生物活性的晚期氧化蛋白产物的方法.设计、时间及地点:单一样本观察,于2008-09/10在解放军第三军医大学检验系临床生化教研室完成.材料:人血白蛋白为成都容生有限公司产品,Hitrap 26/60 sephacryl S-300为GE Healthcare产品.方法:首先纯化人血白蛋白,将纯化的人血白蛋白与次氯酸体外孵育法制备晚期氧化蛋白产物一人血白蛋白,经Hitrap26/60sephacryl S-300分离纯化.并经变性及非变性电泳、分子筛蛋白标准鉴定其相对分子质量,经单核细胞肿瘤坏死因子α分泌实验鉴定其结构特征和生物学活性.主要观察指标:①人血白蛋白的纯化及电泳结果.②晚期氧化蛋白产物纯化及电泳结果.③晚期氧化蛋白产物-人血白蛋白促单核细胞肿瘤坏死因子α分泌的量效关系.结果:经变性及非变性电泳、分子筛蛋白标准鉴定其相对分子质量为670 000,能够显著刺激单核细胞肿瘤坏死因子α的分泌,时间效应显示AOPPs-HSA(1 g/L)刺激6 h,单核细胞肿瘤坏死因子α的分泌量就已显著性升高,12 h升至最高水平.结论:采用上述方法能够制备及纯化晚期氧化蛋白产物,且纯化后的晚期氧化蛋白产物具有生物学活性,为晚期氧化蛋白产物的进一步研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	田梅	解放军第三军医大学西南医院肾科	10	45	4.0	6.0
2	易维京	解放军第三军医大学检验系临床生化教研室	2	3	1.0	1.0
3	余荣杰	解放军第三军医大学西南医院肾科	1	0	0.0	0.0
4	吴雄飞	解放军第三军医大学西南医院肾科	3	2	1.0	1.0