免疫磁珠法分选骨髓CD34+细胞:纯度影响因素的分析

• 作者: 张开明 梁宏刚
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: CD34+细胞 造血干细胞 免疫磁珠 分选
• 年，卷（期）: 2009,（40）
• 所属期刊栏目: 研究与报告
• 页码范围: 7825-7828
• 页数: 4页
• 分类号: R394.2
• 字数: 4214字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2009.40.003

摘要

背景:免疫磁珠分选技术已成为分选CD34+细胞的主要方法之一,在长期实验中发现诸多因素影响其分离纯度,包括磁珠与细胞孵育时干冰与碎冰的使用、磁珠与细胞孵育及分离时摇床的摇摆方向、红细胞裂解液裂解单个核细胞的使用等.目的:在免疫磁珠分选CD34+细胞过程中分别对上述影响因素进行分析改进,以提高分选CD34+细胞的纯度.设计、时间及地点:细胞学体外对照观察,于2008-07/2009-03在太原市中心医院皮肤科实验室完成.材料:骨髓象筛选正常的人骨髓29份,由太原市中心医院血液科提供,取材均经患者同意.CD34+免疫磁珠为Dynal公司产品.方法:采用淋巴细胞分离液密度梯度离心法分离培养人骨髓单个核细胞,用免疫磁珠法分选骨髓CD34+细胞,对其分选过程中的主要环节如冰块与碎冰、摇床的种类以及红细胞裂解液的使用进行方法改进.方法1:按试剂盒提供方法进行磁珠常规分选CD34+细胞.方法2:在方法1基础上,用碎冰替代冰块进行磁珠与单个核细胞孵育.方法3:在方法2基础上,用万向摇床替代水平摇床.方法4:在方法3基础上,向单个核细胞中预先加入红细胞裂解液裂解残留红细胞.主要观察指标:通过流式细胞仪检测不同方法分选出的CD34+细胞纯度.结果:随着不同环节的逐渐改进,CD34+细胞纯度由(32.7±6.6)%升至(84.5±512)%,方法1,2,3,4所分选出的CD34+细胞纯度逐渐升高,组间方差分析差异显著(F=76.209,P<0.01),Bonferroni法两两比较差异亦有非常显著性意义(P<0.01).结论:碎冰、万向摇床及红细胞裂解液的使用能有效提高免疫磁珠法分选人骨髓CD34+细胞的纯度.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张开明	太原市中心医院皮肤科	92	470	10.0	17.0
2	梁宏刚	山西医科大学第二临床医学院皮肤科	1	9	1.0	1.0