基因枪转人碱性成纤维细胞生长因子基因促进深Ⅱ度烧伤创面的愈合

• 作者: 吴杭庆 夏照帆 常菲 张望 张毅 杨长伟 路卫
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 烧伤 基因枪 生长因子 创面愈合
• 年，卷（期）: 2009,（24）
• 所属期刊栏目: 组织构建与生物活性因子
• 页码范围: 4611-4615
• 页数: 5页
• 分类号: R394.112
• 字数: 1170字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2009.24.001

摘要

背景:大量的体内和体外实验已证实,碱性成纤维细胞生长因子对不同组织和细胞具有广泛作用,可加快创面愈合进程.目的:观察基因枪转人碱性成纤维细胞生长因子基因促进深Ⅱ度烧伤创面愈合的效果和可行性.设计、时间及地点:完全随机设计,观察实验,于2007-12/2008-10在解放军第二军医大学长海医院全军烧伤中心实验室完成.材料:SD清洁级大鼠,体质量200-250 g,雌雄不拘.方法:将天然人碱性成纤维细胞生长因子基因重组优化,以pCI-neo为载体构建重组人碱性成纤维细胞生长因子基因高效真核表达载体pCI-neo-bFGF,并转染人胚肾细胞293T细胞,转染后以dot blot和western blot检测碱性成纤维细胞生长因子的表达.利用基因枪技术对SD大鼠深Ⅱ度烧伤创面模型进行转基因,以转染pCI-neo-bFGF为实验组,以转染空载体pCI-neo为对照组.主要观察指标:记录创面愈合时间,在转基因后24 h,48 h,96 h,7d,10d和14d测定创面组织羟脯氨酸和胶原酶Ⅰ水平,评价创面愈合情况.结果:重组构建的pCI-neo-bFGF经转染人胚肾细胞293T细胞,dot blot和western blot 检测结果显示,构建的pCI-neo-bFGF表达载体可表达人碱性成纤维细胞生长因子,荧光显微镜下合成基因的表达水平明显高于天然基因表达;基因枪转基因实验结果显示,实验组创面愈合时间为(13.00±1.31)d,对照组为(14.75±1.28)d,两组相比较差异有显著性意义(P＜0.05):两组羟脯氨酸及胶原酶Ⅰ水平均于基因枪转染后48h即伤后第5天达到高峰,随后逐渐下降至一定水平后维持,实验组各时间点羟脯氨酸水平均高于对照组(P＜0.05,P＜0.01);实验组转基因后48 h和96 h胶原酶Ⅰ水平明显高于对照组(P＜0.01).结论:基因枪转人碱性成纤维细胞生长因子基因可以缩短创面愈合时间.增加创面愈合期间组织羟脯氪酸和胶原酶Ⅰ水平,加快深Ⅱ度烧伤创面愈合进程.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	夏照帆	解放军第二军医大学长海医院烧伤科	17	72	5.0	7.0
2	吴杭庆	解放军第二军医大学长海医院烧伤科	7	30	3.0	5.0
3	常菲	解放军第二军医大学长海医院烧伤科	1	2	1.0	1.0
4	张望	解放军第二军医大学长海医院烧伤科	1	2	1.0	1.0
5	杨长伟	解放军第二军医大学长海医院骨科	3	13	2.0	3.0
6	路卫	解放军第二军医大学长海医院烧伤科	2	4	2.0	2.0