疏密波最佳波段组合诱导大鼠骨髓间充质干细胞向软骨细胞的分化

• 作者: 刘伯龄 刘献祥 吴广文 陈文列 黄云梅
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 骨髓间充质干细胞 疏密波 软骨细胞
• 年，卷（期）: 2009,（6）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 1059-1063
• 页数: 5页
• 分类号: R394.2
• 字数: 5591字
• 语种: 中文

摘要

背景:已证实疏密波对病变组织有兴奋作用,能够促进病变组织的新陈代谢,课题组前期研究发现其对骨关节炎具有良好的治疗作用.目的:探讨疏密波诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的最佳波段组合,并从分子生物学水平阐明疏密波调控骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的机制.设计、时间及地点:细胞学体外对照观察,于2006-10/2008-03在福建中医学院中两医结合研究院完成.材料:清洁级健康4周龄SD人鼠45只,由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供.疏密波发射仪由福州大学生物医学仪器研究所提供.根据同一周期疏密波比例的不同,分为以下3种工作模式:模式Ⅰ为疏波:密波=1:1,模式Ⅱ为疏波:密波=2:1,模式Ⅲ为疏波:密波=1:2.方法:抽取大鼠骨髓液,用全骨髓贴壁培养法体外分离纯化培养大鼠骨髓间充质干细胞.取传至第3代细胞,接种后加入含体积分数为0.15胎生血清的DMEM培养液,根据仪器T作模式的不同分为:疏密波1:1组、疏密波2:1组、疏密波1:2组、空白对照组.各诱导组按干预时间的不同又分为2个亚组:诱导30 min和诱导60 min,每天诱导1次,共14d.主要观察指标:RT-PCR半定量分析Cbfa1 mRNA及Sox9mRNA的表达,甲苯胺蓝染色检测糖胺聚糖的表达,免疫组化染色检测Ⅱ型胶原基质的表达.结果:体外培养14d可获得均质性较好的骨髓间充质干细胞,传至第3代CD45阳性率为1.91%,CD90阳性率为98.22%.诱导14d后,各疏密波诱导组Cbfa1 mRNA,Sox9 mRNA均呈阳性表达,而空白对照组未表达.甲苯胺蓝染色可见诱导后细胞胞质和细胞外基质异染,空白对照组无明显异染:免疫组化染色可见各诱导组多数细胞的胞浆呈棕黄色阳性表达,且疏密波1:2组Ⅱ型胶原的表达优于疏密波2:1组,疏密波2:1组优于疏密波1:1组,空白对照组细胞为阴性表达.结论:疏密波能诱导大鼠骨髓间充质干细胞体外分化为软骨细胞表型,且疏波:密波=1:2的波段组合效果最佳,其作用主要足通过上调Cbfa1 mRNA和Sox9 mRNA的表达进而促进糖胺聚糖和Ⅱ型胶原基质的表达来实现的.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈文列	福建中医学院中西医结合研究院	37	237	10.0	14.0
2	刘献祥	福建中医学院中西医结合研究院	180	3130	30.0	47.0
3	吴广文	福建中医学院中西医结合研究院	52	441	10.0	18.0
4	刘伯龄	福州市第二医院骨科	11	58	5.0	7.0
5	黄云梅	福建中医学院中西医结合研究院	25	170	8.0	12.0