摘要:
背景:试管法分离脐血干细胞效率低,易发牛微生物污染,应用临床安伞性得不到保证,寻找一种能满足临床需要的脐血干细胞分离方法用于治疗骨股头坏死尤为迫切.目的:拟建屯一种高效、安全且具有临床应用价值的脐血干细胞分离方法.设计、时间及地点:自身前后对照实验,于2006-02/2007-08在河南省红十字血液中心血液成分应用研究所及郑州市第二人民医院外一科完成.对象:2006-02/2007-08在郑州市第二人民医院外一科住院和门诊收治的股骨头坏死患者8例,均为男性,平均年龄40.6岁,4例合并激素应用史.脐带血来自郑州市妇幼保健院正常足月分娩的健康胎儿,平均采血量90 mL.分离所片j叫联袋包括1个主袋、1个空袋、2个生理盐水袋,为山东威高集团产品.方法:将采集6 h内的脐血用无菌接口机与四联袋的1个空袋相连,离心分出部分血浆后,剩余的红细胞内加入羟乙基淀粉充分混匀,静止5 min后加入氯化钠液等倍稀释,淋巴细胞分离液倒入四联袋的主袋内,按1:1比例将脐血缓缓加入盛有淋巴细胞分离液的主袋内,离心后白膜层流入另1个空袋内,此袋即为富单核细胞溶液.将保存24 h内的脐血单个核细胞用脐血浆悬浮后,经手背浅静脉输注给股骨头坏死患者,单个核细胞≥1×108/份,2份/次,间隔3 d后再次输注,共3次,此为1个疗程,共3个疗程,每个疗程间隔两三个月.主要观察指标:脐血单个核细胞回收率及细胞活性,患者临床症状改善情况.结果:分离的脐血单个核细胞收率高、效果好,且分离过程不易发生微生物污染.8例患者关节疼痛均有不同程度的缓解或消失,有效率 100%;髋关节外展与内旋功能、行走距离及步态变化均有明显改善.细胞移植后6个月,5例可见不同程度的股骨头坏死区骨质密度的改变,2例股骨头形态恢复正常,另外1例无变化;12髋关节腔积液减少或消失,9髋MRl图像低信号区所占股骨头体积的百分比减少,3髋无变化.在细胞移植过程中及移植后均无并发症及发热、过敏等不良反应.结论:应用四联袋结合无菌接口技术分离脐血干细胞高效、安全,且具有临床应用价值,经静脉多次、多份输注脐血干细胞为伞身整体治疗股骨头坏死提供了一种新的手段.