摘要:
背景:研究发现,珍珠液有促组织细胞再生、消除瘢痕等功效.目的:观察珍珠液对人皮肤瘢痕成纤维细胞增殖的影响.设计、时间及地点:分组对比观察实验,于2008-09/12在广西医科大学医学实验中心完成.材料:瘢痕组织组织标本来自广西医科大学整形外科患者.珍珠液是珍珠的水解液,含有多种氨基酸、多肽、维生素、矿物质和天然酶等.购自北海国发生物有限公司.方法:参考Veelken方法进行成纤维细胞原代及传代培养,反复传代去除非成纤维细胞成分后,建立人皮肤瘢痕细胞系.取对数生长期的人皮肤瘢痕成纤维细胞3~5代,用胰蛋白酶消化成单细胞悬液,接种于96孔塑料培养板,密度为0.5×10~4/孔,每孔加入100μL的细胞悬液和100μL的DMEM培养基,常规培养24h后吸弃原培养液,实验分组:珍珠液组:加入已经配置的含珍珠液质量浓度为125.00,62.50,31.30,15.60,7.80,3.90,1.95,0.98mg/L的培养基200μL;对照组:每孔只加200μL的培养基.主要观察指标:MTT法检测成纤维细胞增殖情况,TUNEL法检测成纤维细胞凋亡情况.结果:珍珠液对成纤维细胞的半效抑制浓度IC_(50)为15mg/L,除0.98mg/L质量浓度外,其余质量浓度均能有效地抑制成纤维细胞的生长,且呈剂量依赖性抑制成纤维细胞的生长,珍珠液的浓度越高,对成纤维细胞的抑制率越大.剂量IC_(50)=15mg/L培养的成纤维细胞体积缩小、胞质少、密度变小,凋亡细胞多、呈棕黄色.对照组成纤维细胞体积大、胞质丰富、密度大.珍珠液作用后的细胞凋亡指数高于空白对照组(P<0.01).结论:珍珠液能抑制体外培养皮肤瘢痕成纤维细胞的生长,并诱导其凋亡.