以Triton X-100和脱氧胆酸钠为萃取剂制备兔脱细胞神经基质:有最佳时间吗?

• 作者: 丁长岭 刘道峰 姜炜鹏 左金华 徐杰 李继奎
• 来源期刊: 中国组织工程研究与临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 脱细胞神经 制备条件 基质
• 年，卷（期）: 2009,（47）
• 所属期刊栏目: 软组织支架材料
• 页码范围: 9241-9244
• 页数: 4页
• 分类号: R318
• 字数: 5211字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8225.2009.47.007

摘要

背景:与其他脱细胞神经基质制备方法相比,化学萃取的去细胞同种异系(体)神经组织内细胞成分可以较完全地清除,进一步减少了发生免疫排斥反应的可能性,并能较好地保留神经支架的完整性,但制备过程中的相关问题有许多尚需讨论.目的:应用Triton X-100和脱氧胆酸钠化学萃取剂处理新西兰大白兔的面神经,提出脱细胞神经基质制备的所需试剂及最佳时间.设计、时间及地点:随机分组,对比观察细胞学实验,于2009-02/06在滨州医学院附属医院口腔科学实验室完成.材料:3月龄新西兰大白兔15只,体质量2.5-3.0 kg.Triton X-100、脱氧胆酸钠由美国Sigma公司提供.方法:取兔双侧面神经,在手术显微镜下去除神经表面的脂肪组织和神经外膜,将其分为每段10 mm长,共66条.将66条神经随机分成11组,每组6条.除正常对照组外,其余10组均放入培养皿中,先用蒸馏水室温下浸浴12 h,以使细胞和髓鞘在低渗液体中膨胀,使部分细胞被胀破:然后将其中5组置于3%Triton X-100 12,24,36,48,60 h,室温下振荡,另外5组用3%Triton X-100和4%脱氧胆酸钠先后作用12 h(为1个周期),室温下反复振荡1-5个周期.主要观察指标:常规苏木精-伊红染色,光镜下观察去细胞程度及纤维管道结构的完整性.结果:单独应用Triton X-100处理神经即使作用60 h,仍不能将神经中的所有细胞成分去除,且许旺细胞基底膜有较大破坏;Triton X-100配合脱氧胆酸钠处理处理2个周期,可有效地去除神经中的细胞成分及神经纤维髓鞘和轴突,保留完整的许旺细胞基底膜,周边可见神经外膜和束膜.结论:大白兔面神经经Triton X-100和脱氧胆酸钠室温处理2个周期,并不停地振荡,可完全去除神经组织中的所有细胞成分,保留完整的许旺细胞基底膜,得到脱细胞的神经基质.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	左金华	滨州医学院附属医院口腔颌面外科	57	182	7.0	10.0
2	姜炜鹏		4	7	1.0	2.0
3	李继奎	滨州医学院附属医院口腔颌面外科	4	5	1.0	2.0
4	刘道峰	东营市胜利油田中心医院口腔科	2	5	1.0	2.0
5	徐杰	济南市口腔医院口腔颌面外科	8	14	2.0	3.0
6	丁长岭		1	4	1.0	1.0