青海云杉ISSR-PCR反应体系的建立与优化

• 作者: 李栋栋 李毅 王文峰 马彦军
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 青海云杉 ISSR 体系建立 优化
• 年，卷（期）: 2009,（21）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 9869-9871
• 页数: 3页
• 分类号: S188
• 字数: 2528字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2009.21.022

摘要

[目的]确定适应青海云杉ISSR-PCR反应的最佳反应体系.[方法]以青海云杉(Picea crassifolia kom.)为材料,对影响其ISSR-PCR扩增结果的各因素(Mg2+、dNTPs、TaqDNA聚合酶、模板DNA、引物、退火温度)进行筛选和优化.[结果]青海云杉ISSR-PCR最佳反应体系为在20 μl反应体系中包含1 μl 10×buffer,1.5 mmol/L的Mg2+,0.2 mmol/L的dNTPs,TaqDNA聚合酶1.0 U,模板DNA 40 ng,引物0.6 μmol/L.对青海云杉ISSR-PCR最佳反应体系的退火温度进行梯度试验发现,引物UBC818的最适退火温度为54.2 ℃,且最适退火温度因引物而异.[结论]该优化ISSR-PCR反应体系的建立,为今后利用ISSR技术进行青海云杉种质资源分类、遗传图谱构建和基因定位奠定了技术基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李毅	甘肃农业大学林学院	179	2150	25.0	35.0
2	马彦军	甘肃农业大学林学院	62	506	13.0	20.0
3	李栋栋	甘肃农业大学林学院	3	20	3.0	3.0
4	王文峰	甘肃农业大学林学院	3	20	3.0	3.0