石蜡包埋乳腺癌组织的RNA提取及基因表达研究

• 作者: 吴世凯 孙冰 宋三泰 张利利 张峰 江泽飞 王敦梅 苏敏 郭晓红
• 来源期刊: 山东医药
• 学科: 医学
• 关键词: 石蜡包埋组织 RNA提取 实时逆转录聚合酶链反应 基因表达
• 年，卷（期）: 2009,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 15-17
• 页数: 3页
• 分类号: R737.9
• 字数: 2330字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-266X.2009.12.006

摘要

目的 探索从石蜡包埋乳腺癌样本中提取总RNA的质量和产量,并检测其基因的表达情况.方法 收集保存时间1～17 a不等的人乳腺癌石蜡组织样本153例,取5 μm厚切片1～15张,用Roche和Ambion两种试剂盒提取总RNA.采用随机引物将mRNA反转录为cDNA,SYBR Green Ⅰ染料法实时荧光定量PCR分析ACTB、GAPDH、RPLPO和GUSB管家基因mRNA的表达情况.结果 153例标本总RNA浓度在3～375 ng/μl范围,总产量0.18～18.5 μg,A260/280值在1.32～2.07范围,RNA琼脂糖凝胶电泳片段弥散在100～1 000 bp之间.81例样本的4个管家基因的平均Ct值在24～30范围,随着样本保存时间的延长,Ct值也逐渐增加.结论 从石蜡包埋样品标本中提取的RNA产量及质量可满足实验的要求,总RNA有所降解,但可以进行目的 基因mRNA的检测, 保存10 a以上的样本也能够进行基因表达研究,在基础研究和临床实践方面具有广阔的应用价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张峰	中国科学院北京基因组研究所	149	3496	30.0	56.0
2	江泽飞		131	1256	18.0	29.0
3	宋三泰		133	1186	17.0	28.0
4	苏敏	汕头大学医学院	61	294	10.0	13.0
5	吴世凯		47	258	9.0	14.0
6	孙冰		13	49	4.0	6.0
7	张利利	中国科学院北京基因组研究所	6	37	4.0	6.0
8	郭晓红	汕头大学医学院	3	11	1.0	3.0
9	王敦梅	中国科学院北京基因组研究所	3	11	1.0	3.0