高效疏水相互作用色谱法复性与同时纯化重组人Flt3配体的包涵体蛋白质

• 作者: 王骊丽 耿信笃 贾佳 高栋
• 来源期刊: 色谱
• 学科: 化学
• 关键词: 高效疏水相互作用色谱法 复性 纯化 重组人Flt3配体 包涵体
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 535-540
• 分类号: O658
• 字数: 5322字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1123.2010.00535

摘要

Flt3配体(FL)是一类具有促进早期造血功能的细胞因子,在促进造血细胞生长发育及造血动员方面具有重要的临床应用价值.为了用基因工程方法获得大量用于临床和研究的重组人FL(rhFL)蛋白质,本文对在大肠杆菌(E. coli)中表达得到的Flt3配体的包涵体进行回收、洗涤,溶解于8 mol/L 脲后在高效疏水相互作用色谱(HPHIC)柱上进行rhFL包涵体的复性与同时纯化,并对其保留特征和复性规律进行了研究.结果表明,在连续进样、变性蛋白质质量浓度为8.51 g/L、固定相选用端基为PEG800、流动相添加4 mol/L 脲、1.8 mmol/L 还原型谷胱甘肽(GSH)和0.3 mmol/L氧化型谷胱甘肽(GSSH)、pH 7.0的优化条件下,复性与同时纯化rhFL包涵体的质量回收率为36.9% ,纯度达94.5%以上.本文仅用一步HPHIC法成功地复性与同时纯化了rhFL蛋白质,为获得高活性的rhFL产品奠定了一定的工作基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	贾佳		1	4	1.0	1.0
2	王骊丽		2	7	2.0	2.0
3	高栋		1	4	1.0	1.0