瞬时受体电位通道家族M8型受体转基因小鼠模型的建立

• 作者: 刘道燕 曹廷兵 王利娟 祝之明 罗志丹 郝新忠 马丽群 马双陶
• 来源期刊: 中国医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 瞬时受体电位通道家族M8型受体 显微注射法 转基因小鼠
• 年，卷（期）: 2010,（4）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 251-254
• 分类号: R394
• 字数: 2702字
• 语种: 中文

摘要

目的 建立瞬时受体电住通道家族M8型受体(TRPM8)转基因小鼠模型.方法 通过显微注射法将pcDNA3.1-hTrpm8导入C57BL/6J×CBA F1小鼠的受精卵中,并将其移植到假孕母鼠输卵管中获得子代小鼠.采用PCR方法鉴定子代基因型,通过RT-PCR和免疲印迹法检测Trpm8基因及蛋白在组织中的表达.结果 将405枚注射受精卵移植给15只假孕鼠,其中13只顺利妊娠并产下95只子鼠,经PCR鉴定得到5只转基因阳性首建鼠,其中4只小鼠可稳定传代,经与C57BL/6J小鼠回交7代后互交数代建系.子代转基因小鼠经RT-PCR检测发现Trpm8基因在心脏、肝脏、肾脏、脂肪和骨骼肌中均有表达,且TRPM8蛋白表达在转基因小鼠中显著增加.结论 通过显微注射法成功建立了Trpm8转基因小鼠模型.