miRNA模拟物转染人支气管上皮细胞的影响因素和条件筛选

• 作者: 尹立红 梁戈玉 浦跃朴
• 来源期刊: 癌变·畸变·突变
• 学科: 生物学
• 关键词: 人支气管上皮细胞 miRNA 脂质体 转染
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 166-170,174
• 分类号: Q291
• 字数: 4547字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-616X.2010.03.002

摘要

目的:研究miRNA模拟物浓度、脂质体浓度、转染时间对人支气管上皮细胞转染效果和毒性的影响,筛选miRNA模拟物转染人支气管上皮细胞的最适宜条件.方法:分别应用0、10、30、50 nmol/L化学合成的、经Cy3标记的miRNA模拟物,以0、0.1%、0.3%、0.5%浓度的脂质体转染剂转染人支气管上皮细胞,转染6、12、24 h后应用荧光显微镜观察细胞转染情况,计算荧光强度,评价转染效果;转染24 h后,应用WST-8法检测不同转染条件对细胞活性的影响.结果:随着miRNA模拟物、脂质体浓度增加和转染时间的延长,细胞内荧光信号增强.30和50 nmol/L miRNA模拟物的转染效率明显高于10 nmol/L组(P<0.05);0.3%和0.5%脂质体组的转染效率明显高于0.1%组(P<0.05);转染24 h的荧光强度明显高于转染12 h和6 h组(P<0.05).与对照组相比,转染24 h后各转染组细胞活性无显著性变化(P>0.05).结论:人支气管上皮细胞适合应用脂质体进行化学合成miRNA模拟物的转染研究,miRNA模拟物浓度、脂质体浓度、转染时间均是转染的重要影响因素,30 nmol/L miRNA模拟物、0.3%脂质体、转染24 h可获得理想的转染效果,转染后对细胞活性无影响.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	浦跃朴	东南大学公共卫生学院环境医学工程教育部重点实验室	176	2029	25.0	35.0
2	尹立红	东南大学公共卫生学院环境医学工程教育部重点实验室	139	1526	20.0	32.0
3	梁戈玉	东南大学公共卫生学院环境医学工程教育部重点实验室	46	344	10.0	17.0