猪DECR1基因cDNA的克隆、序列分析及原核表达研究

• 作者: 周忠孝 曹果清 李步高 杨晓奋 王效京 郭晓红
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪 DECR1基因 克隆 RACE 序列分析 原核表达
• 年，卷（期）: 2010,（11）
• 页码范围: 1371-1378
• 分类号: S828|Q344
• 字数: 4698字
• 语种: 中文

摘要

旨在研究猪2,4-dienoyl-CoA reductasel(DECR1)基因的结构,揭示该基因的原核表达规律.试验以山西马身猪的肝脏组织为材料,采用RT-PCR与RACE技术克隆了DECRl基因的cDNA全序列,并将其重组于pET32a+原核表达载体中,经酶切、序列鉴定正确后,重组质粒转化大肠杆菌BL21进行诱导表达.结果表明:猪DECR1基因的cDNA全长2 352 bp,包括987 bp的开放阅读框(ORF),53 bp的5'非翻译区(UTR)和1 312 bp的3'-UTR;编码区(CDS)编码328个氨基酸残基与猪(电子预测序列)、牛、人、猩猩、猴、马、犬、鼠相应序列的同源性分别为99%、88%、88%,87%,87%、87%、87%和83%;SDS-PAGE电泳结果显示,在IPTG诱导4 h时,外源蛋白表达效率最高;Western blot检测发现经诱导表达的蛋白产物大小约为35 ku,与预测的大小一致.猪DECR1基因的克隆和表达研究,为进一步探究该基因的生物学功能及其分子遗传机制提供了理论基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭晓红	山西农业大学动物科技学院	44	280	8.0	15.0
2	周忠孝	山西农业大学动物科技学院	78	808	16.0	24.0
3	曹果清	山西农业大学动物科技学院	73	450	11.0	18.0
4	李步高	山西农业大学动物科技学院	53	228	7.0	13.0
5	王效京		22	37	4.0	4.0
6	杨晓奋	山西农业大学动物科技学院	5	31	3.0	5.0