蜂毒肽融合蛋白在裂殖酵母中的表达研究

• 作者: 刘志昭 潘宇 胡宗利 邓磊 陈国平
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 蜂毒肽 裂殖酵母 蛋白表达 GST亲和层析
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 33-38
• 页数: 6页
• 分类号: Q516
• 语种: 中文

摘要

将抗菌肽之一的蜂毒溶血肽(Melittin)基因序列定向克隆到表达载体pESP-2中,构建GST-Melittin融合蛋白.利用载体上严格受硫胺素浓度调控的启动子Pnmtl,采用先扩大培养后诱导表达的两步培养法,实现了融合蛋白在裂殖酵母Schizosaccharomyces Pombe中的异源表达.然后通过GST亲和层析法一步纯化得到融合肽.研究中1 L培养液收集到约5 g鲜活酵母菌.纯化得到400/μg融合蛋白,融合蛋白经SDS-PAGE和Westem blot验证,表明蜂毒肽融合蛋白已在裂殖酵母中高效的表达,并可以通过GST亲和层析法得到有效纯化.初步的活性实验证明所获得Melittin蛋白对Escherichia Coli DH5α菌种有良好的抑菌效果.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡宗利		53	641	12.0	24.0
2	陈国平		56	671	12.0	25.0
3	邓磊		3	21	2.0	3.0
4	潘宇		7	27	3.0	5.0
5	刘志昭		1	0	0.0	0.0