化学修饰木瓜蛋白酶的酶学性质研究

• 作者: 吴巧儿 熊亚红 苏健鸿
• 来源期刊: 分子催化
• 学科: 化学
• 关键词: 木瓜蛋白酶 化学修饰 稳定性 动力学 热力学参数
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 页码范围: 529-536
• 分类号: Q55|O643.32
• 语种: 中文

摘要

采用邻苯二甲酸酐(PA)对木瓜蛋白酶进行了化学修饰,通过三硝基苯磺酸法、紫外光谱、 荧光光谱及FT-IR光谱对修饰效果进行了初步表征,采用动力学方法考察了pH和温度对修饰酶水解活性和稳定性的影响,并计算了一系列动力学和热力学参数. 实验结果表明: PA对木瓜蛋白酶的平均氨基修饰度为43%,未对酶的活性基团-SH发生修饰,修饰酶较原酶的紫外吸收峰和最大荧光发射峰均发生蓝移,紫外吸收强度降低、荧光强度增大; PA修饰未改变木瓜蛋白酶的最适反应温度,但将其最适反应pH由7.0提高到8.5,且酶活力也提高了约20%; PA修饰有效提高了酶的催化水解效率和酶与底物的亲和力,如40 ℃、 最适pH条件下修饰酶的转化数kcat(3.03 s-1)和亲和力kcat/Km(1.70 s·L·g-1)均较原酶的(2.28 s-1、 1.15 s·L·g-1)高,修饰酶催化水解反应的活化能Ea(25.4 kJ·mol-1)较原酶的(29.3 kJ·mol-1)低; PA修饰还明显提高了酶的pH稳定性和热稳定性,半衰期t1/2延长,酶分子的热变性活化能Ea,d由77.0 kJ·mol-1提高到94.5 kJ·mol-1. 可见PA化学修饰法是一种有效改善木瓜蛋白酶的催化性质和稳定性的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	熊亚红	华南农业大学理学院生物材料研究所	25	272	7.0	16.0
2	吴巧儿	华南农业大学理学院生物材料研究所	1	4	1.0	1.0
3	苏健鸿	华南农业大学理学院生物材料研究所	3	27	3.0	3.0