凡纳滨对虾溶菌酶基因在毕赤酵母中的分泌表达和活性检测

• 作者: 刘兆普 卞曙光 姜鹏 张海波 秦松 陈华新
• 来源期刊: 水生生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 凡纳滨对虾 溶菌酶 毕赤酵母 分泌表达 抑菌活性
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 页码范围: 1091-1096
• 分类号: Q786
• 字数: 4650字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1035.2010.01091

摘要

原核重组表达的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)溶菌酶蛋白主要以包涵体形式存在,经变性和复性处理后活性仍较差.研究将凡纳滨对虾溶菌酶基因(Lvlyz 基因)克隆至毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K中,电击转化毕赤酵母 GS115 细胞,经组氨酸营养缺陷培养基筛选和PCR检测获得转化子.对其进行连续甲醇诱导表达,利用SDS-PAGE和C端携带的6 × His标签,对发酵液上清进行Western blot检测,结果表明19.3 kD左右的条带即是重组表达的溶菌酶蛋白.用溶壁微球菌平板抑菌法鉴定表达产物具有较强的抑菌能力.研究首次利用毕赤酵母真核表达系统实现对虾溶菌酶基因的可溶性表达,并且表达产物的活性良好.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘兆普	南京农业大学海洋生物学江苏省重点实验室	194	4697	38.0	56.0
2	秦松	中国科学院海洋研究所	179	1772	22.0	33.0
3	姜鹏	中国科学院海洋研究所	31	367	12.0	18.0
4	陈华新	中国科学院海洋研究所	4	27	4.0	4.0
5	张海波	上海海洋大学水产与生命学院	3	21	3.0	3.0
6	卞曙光	南京农业大学海洋生物学江苏省重点实验室	1	4	1.0	1.0