编码日本血吸虫Argonaute蛋白全长cDNA克隆、表达及初步鉴定

• 作者: 刘宗平 杨燕萍 林矫矫 程国锋 郭素霞 陈晶
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 日本血吸虫 Argonaute蛋白 RACE 功能分析
• 年，卷（期）: 2010,（9）
• 页码范围: 830-834
• 分类号: R383.2
• 字数: 3944字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2010.09.009

摘要

目的 获得编码日本血吸虫Argonaute基因的全长cDNA,并进行克隆和重组融合蛋白表达.方法 利用RACE技术获得编码日本血吸虫Argonaute基因的全长cDNA并对其进行生物信息学分析.利用实时荧光定量PCR(Real time PCR) 分析该基因在日本血吸虫中的转录情况.原核表达保守功能域蛋白和全长蛋白,利用保守功能域重组融合蛋白免疫昆明系小鼠制备多克隆抗体.免疫印迹(Western blot)进行免疫学分析.结果 本研究获得了一个编码日本血吸虫Argonaute基因的全长cDNA,其完整开放阅读框为3 030 bp,编码1 009个氨基酸,预测分子量为111.7 kDa.生物信息学分析表明该基因编码的蛋白序列具有Argonaute家族蛋白的典型结构域特征,且与人、鼠Argonaute蛋白具有较高的同源性. Real-time PCR分析表明该基因在7,14日龄的日本血吸虫童虫中转录较高.Western blot分析制备的多抗具有较高的特异性并能识别全长融合蛋白.结论 获得了编码日本血吸虫Argonaute基因的cDNA及重组蛋白,为进一步研究该蛋白的功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘宗平	扬州大学兽医学院	245	1334	18.0	26.0
2	林矫矫	中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室	56	456	11.0	20.0
3	程国锋	中国农业科学院上海兽医研究所	11	33	4.0	5.0
4	陈晶	中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室	4	10	2.0	3.0
5	杨燕萍	中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室	1	5	1.0	1.0
9	郭素霞	中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室	1	5	1.0	1.0