RNA干扰联合抑制PI3KP85和AKT1表达对U251胶质瘤细胞侵袭的影响

• 作者: 岳晓 康春生 张安玲 杨旸 浦佩玉 王广秀 贾志凡 韩磊
• 来源期刊: 中华神经医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 神经胶质瘤 肿瘤浸润 RNA干扰 丝/苏氨酸蛋白激酶1 3-羧基磷脂酰肌醇激酶
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 566-570
• 分类号: R730.264
• 字数: 3327字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1671-8925.2010.06.007

摘要

目的 探讨应用RNA干涉(RNAi)技术抑制U251恶性胶质瘤细胞丝/苏氨酸蛋向激酶1(AKT1)和3-羧基磷脂酰肌醇激酶的85000催化亚基(P13KP85)表达后对U251胶质瘤细胞侵袭的抑制作用.方法 实验设正常对照组(未做任何处理);阴性对照组(rAd-HK组):用无义序列重组腺病毒感染U251胶质瘤细胞;基凶治疗组(rAd-A+P组):用靶向AKT1和P13KP85的重组腺病毒感染U251胶质瘤细胞.应用实时PCR检测AKT1和P13KP85 mRNA水平的变化;应用Western blot方法 检测AKT1和P13KP85蛋白水平的变化,并对肿瘤细胞中相关功能蛋白的表达进行分析;应用酶联免疫分析法(ELISA)检测细胞外基质金属蛋白酶2(MMP2)和基质金属蛋白酶9(MMP9)浓度的变化;应用划痕和Transwell实验评价肿瘤细胞侵袭能力的变化.结果tAd-A+P 可显著抑制U251胶质瘤细胞AKT1和P13KP85的表达.与正常对照组和rAd-HK组比较.rAd-A+P组MMP2、MMP9表达下降,而基质金属蛋白酶抑制因子(TMP2)表达上调,差异有统计学意义(P<0.05).划痕和Transwell实验显示rAd-A+P组细胞体外侵袭能力明显减弱.结论 靶向AKT1和P13KP85的RNAi技术可以显著抑制U251胶质瘤细胞AKT1和PDKP85表达,对U251胶质瘤细胞的侵袭能力产生明显抑制作用.