HRM法检测结直肠癌组织KRAS基因密码子12和13点突变

• 作者: 吴一龙 安社娟 苏健 谢至 郑有为 郭爱林 陈世良 陈志红 马冬 黄迎
• 来源期刊: 中华检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 高分辨率熔解法 KRAS基因 结直肠肿瘤
• 年，卷（期）: 2010,（3）
• 所属期刊栏目: 临床实验诊断研究
• 页码范围: 209-212
• 页数: 4页
• 分类号: R73
• 字数: 2761字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2010.03.004

摘要

目的 建立HRM法检测大肠癌患者肿瘤组织KRAS(v-Ki-ras2 Kirsten rat sarcoma viral oncogene homolog)基因突变的方法 .方法 采用HRM法对含不同比例KRAS基因突变型质粒的系列混合样本进行检测,以评价其灵敏度.应用HRM法检测60份大肠癌患者新鲜肿瘤组织KRAS基因密码子12和13的突变状况,并与直接测序法的结果 进行比较分析.结果 HRM法只需在PCR结束后直接运行高分辨熔解,即可获得检测结果 .HRM法可检出系列混合样本中突变型质粒比例为10%的突变,其检测灵敏度达10%.HRM法从60份大肠癌患者组织标本中,检出17份KRAS基因密码子12或13突变(28.3%);直接测序法检出15份(25.0%)突变,2份未检出KRAS基因突变.HRM法检测的敏感度为100%(15/15),特异度为96%(43/45).结论 HRM法在筛选大肠癌标本的KRAS基因突变类型时,具有操作简便、快速、灵敏,单管避免污染等优点,完全符合临床个体化治疗的要求,值得推广.