F18大肠杆菌黏附素受体结合域鉴定新方法

• 作者: 包文斌 原志伟 吴圣龙 朱军 朱吕昌 朱国强 羊扬 葛兆宏 郁磊 陆广富
• 来源期刊: 扬州大学学报（农业与生命科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: F18大肠杆菌 黏附素FedF V型分泌系统 自主转运蛋白 受体结合域
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 页码范围: 1-5
• 分类号: S852.61+2
• 字数: 3931字
• 语种: 中文

摘要

运用DNA重组技术将F18ab和F18ac大肠杆菌黏附素fedF亚单位内的第60～109位氨基酸残基区段(fedF1)和fedF全基因克隆人V型分泌系统MisL的载客结构域上,经DNA测序确证其正确阅读框后,含重组菌质粒pnirBMisL-fedF或pnirBMisL-fedF1经厌氧诱导后,与断奶仔猪小肠上皮细胞进行体外黏附试验.结果表明:FUT1基因M307位点中GG型和AG型仔猪小肠上皮细胞均能黏附上述重组菌,而AA型个体小肠上皮细胞则不能黏附.上述重组菌均能与兔抗F18ab菌毛FedF亚单位单因子高免血清发生玻板凝集反应.而FedF突变体FedF(M)的重组质粒菌则失去上述凝集和黏附特性.证明F18大肠杆菌黏附素fedF基因及其基因片段fedF1在大肠杆菌表面得到了功能性表达,F18ab和F18ac黏附素FedF直接介导F18大肠杆菌与易感仔猪小肠上皮细胞表面大分子受体黏附结合,fedF1为黏附素FedF的受体主要结合域,其His88、His99是FedF黏附素受体结合域的重要氨基酸残基.