双重RT-PGR方法检测猪流感病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒

• 作者: 刘业兵 宁宜宝 罗俊 陈坚
• 来源期刊: 中国预防兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪流感病毒 猪繁殖与呼吸综合征病毒 双重RT-PCR
• 年，卷（期）: 2010,（9）
• 页码范围: 687-690
• 分类号: S852.65
• 字数: 2754字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0589.2010.09.07

摘要

为建立特异、敏感的猪流感病毒(SIV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的双重RT-PCR检测方法,本研究根据GenBank登录的SIV M基因保守序列和PRRSV美洲型毒株的N基因保守序列,设计合成了2对特异引物,通过对扩增条件的优化,建立检测SIV和PRRSV的双重RT-PCR方法.检测结果显示:该方法可同时扩增出SIV(345 bp)和PRRSv(520 bp)的特异性片段;而猪瘟病毒、猪伪狂犬病病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒2型及阴性鸡胚尿囊液核酸扩增结果均为阴性;对SIV和PRRSV 2种病毒混合液的最小检出量分别为102 EID50/0.1 mL和103TCID50/0.1 mL.应用双重RT-PCR和病毒分离法对12份临床疑似样品进行对比检测,结果表明:除双重RT-PCR检测到双阳性的3份混合感染病料中1份未分离到PRRSV外,其余2份均分离出病毒.证明该方法具有良好的特异性、敏感性,可以用于临床样品的早期快速检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宁宜宝		119	1253	19.0	30.0
2	刘业兵		63	419	11.0	17.0
3	陈坚		6	37	4.0	6.0
7	罗俊		4	20	3.0	4.0