肠致病性大肠埃希菌比色检测的适配体生物传感器研究

• 作者: 吕建新 吴文鹤 崔晓阳 张杰 聂小博 蒋璐茜 陈勇
• 来源期刊: 中华检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 肠致病性大肠杆菌 比色法 SELEX适体技术 生物传感技术
• 年，卷（期）: 2010,（7）
• 所属期刊栏目: 新技术与新方法
• 页码范围: 587-593
• 分类号: R5
• 字数: 6729字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-9158.2010.07.003

摘要

目的 结合纳米技术,构建一种可以快速比色检测肠致病性大肠埃希菌的适配体生物传感器.方法 对已有的适配体序列进行截短设计,将截短后的适配体通过酰胺化反应修饰到PDA纳米囊泡的表面,实现生物传感器的组装.利用适配体与LPS间特异性结合和结合后引起PDA纳米囊泡的颜色变化和比色响应值(CR)改变来定性或定量检测溶液中的肠致病性大肠埃希菌.并通过透射电子显微镜对PDA纳米囊泡与肠致病性大肠埃希菌之间的作用进行验证.结果 成功获得具有结合肠致病性大肠埃希菌功能的适配体截短序列;成功构建可以快速比色检测肠致病性大肠埃希菌的适配体生物传感器,并经透射电镜证实.其不需要特殊仪器,操作简便,检测时间短,仅需30 min;灵敏度较高,检出限为105 CFU/ml,线性范围为105～108CFU/ml;稳定性高,对106 CFU/ml菌液检测的相对标准偏差为6.08%;特异性强,对肠致病性大肠杆菌0111的检测的特异性为100%.结论 本研究成功构建了肠致病性大肠埃希菌适配体生物传感器,实现对肠致病性大肠埃希菌的快速比色检测.