芝麻主要过敏原油质蛋白的基因克隆和原核表达

• 作者: 何凡 刘志刚 邬玉兰
• 来源期刊: 中国油料作物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 芝麻 油质蛋白 过敏原 基因克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 遗传育种
• 页码范围: 41-45
• 分类号: Q785
• 字数: 3807字
• 语种: 中文

摘要

为克隆黑、白芝麻主要过敏原油质蛋白Oleosins的基因并在原核细胞中对其进行表达,本研究分别提取黑、白芝麻的总RNA,逆转录合成cDNA, 根据序列设计简并引物,扩增芝麻主要过敏原油质蛋白Oleosins基因的完整开放阅读框,并与pET-28a载体连接,测序鉴定后转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3)及用IPTG诱导表达.结果表明克隆获得黑、白芝麻主要过敏原油质蛋白Oleosins的全长基因约为438bp的开放阅读框(包括终止密码子),编码145个氨基酸.所编码的蛋白相对分子质量约为15.5kDa,为小分子量蛋白,等电点为5.18,与理论值相符.序列同源性分析发现其与数据库中已知的黑、白芝麻油质蛋白Oleosins基因同源性很高(GenBank黑、白芝麻油质蛋白基因登录号分别为EU999158和EU999159),并在DE3中高效表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邬玉兰	深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所	36	133	6.0	8.0
2	刘志刚	深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所	324	1724	17.0	23.0
3	何凡	深圳大学医学院过敏反应与免疫学研究所	2	6	2.0	2.0