水稻核黄素合酶基因的克隆、表达及多克隆抗体的制备

• 作者: 任海英 刘会敏 吴廷全 孙力军 宋韬 董汉松
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 水稻 核黄素合酶 包涵体 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 遗传育种·耕作栽培·生理生化
• 页码范围: 232-235
• 分类号: S511.035.3
• 字数: 2950字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2010.02.002

摘要

核黄素在生物体内发挥着重要的作用,核黄素合酶(RS)是核黄素合成过程中的一个关键酶.本研究克隆了水稻核黄素合酶基因(OsRS),并将其在Escherichia coli中高效表达.表达产物(包涵体),先用6 mol/L盐酸胍将其溶解,再用8 mol/L尿素透析,将获得的蛋白免疫家兔制备了多克隆抗体.并将抗体与原核表达的OsRS和提取的水稻叶组织总蛋白进行Western blot分析,确定所制备的多克隆抗体具有较好的免疫反应性,为深入解析水稻中核黄素合酶的催化活性和功能奠定了基础.