G蛋白信号转导调节子5参与实验性脉络膜新生血管生成的可能机制

• 作者: 叶子 王雨生 蔡岩 马可
• 来源期刊: 中华眼科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 脉络膜新生血管化 RGS蛋白质类 血管内皮生长因子A
• 年，卷（期）: 2010,（8）
• 页码范围: 731-738
• 分类号: R77
• 字数: 7673字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0412-4081.2010.08.012

摘要

目的 探讨G蛋白信号转导调节子5(RGS5)参与实验性脉络膜新生血管(CNV)生成的可能机制.方法 对照实验研究.采用532 nm激光,对88只(176只眼)雄性棕色挪威(BN)大鼠诱导实验性CNV.其中40只大鼠按光凝后时间分组:光凝后1 d、3 d组各6只大鼠,光凝后7 d组7只大鼠,光凝后14 d组21只大鼠;48只大鼠在光凝后两个时间段按处理因素分组:光凝后7 d的生理盐水组和Avastin注射组各6只大鼠;光凝后14 d的生理盐水组和Avastin注射组各18只大鼠.另选择未进行任何干预的19只大鼠作为正常对照组.分别采用免疫荧光染色法、免疫印迹法和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测大鼠视网膜和脉络膜组织中血管内皮生长因子(VEGF)和RGS5蛋白及其mRNA表达灰度值;组织病理学切片和脉络膜铺片观察CNV厚度和面积.组间RGS5蛋白和mRNA表达、VEGF蛋白和mRNA表达灰度值比较,均采用Student's t检验.结果 (1)RGS5和VEGF蛋白表达水平:光凝后14 d组大鼠RGS5蛋白表达水平达到高峰,灰度值为0.899±0.057,但与正常对照组(0.820±0.032)差异无统计学意义(t=2.079,P＞0.05);光凝后7 d组大鼠VEGF蛋白表达水平最高,灰度值为0.600±0.031,较正常对照组(0.382±0.036)明显升高(t=7.959,P＜0.01).(2)RGS5和VEGF的mRNA表达水平:光凝后1 d和3 d组大鼠RGS5 mRNA表达灰度值分别为0.763±0.035、0.725±0.054,较正常对照组(0.886±0.047)明显下降(t=3.646,3.888;均P＜0.05),光凝后14 d组达到高峰,但与正常对照组差异无统计学意义(t=2.194,P＞0.05);光凝后7 d组大鼠VEGF mRNA表达水平达到高峰,灰度值为0.855±0.029,较正常对照组(0.274±0.039)明显升高(t=20.709,P＜0.01).提示在大鼠CNV形成过程中,RGS5蛋白和mRNA表达高峰期均晚于VEGF蛋白和mRNA表达高峰期.(3)CNV厚度和面积变化:光凝后14 d大鼠CNV形成,CNV厚度为(81.513±10.091)μm,CNV面积为(35 867.167±3159.007)μm2;玻璃体腔注射Avastin后,CNV厚度为(70.967±8.867)μm,CNV面积为(12 397.50±1308.559)μm2;注射Avastin前后的CNV厚度和面积差异有统计学意义(t=2.616,15.179;P＜0.05,0.01).结论 光凝后RGS5与VEGF共同表达于大鼠的CNV区域,RGS5表达高峰期晚于VEGF表达高峰期.玻璃体腔注射Avastin后,在抑制CNV形成过程中,可下调RGS5表达水平.RGS5可能参与了VEGF调控CNV生成的机制.