同时检测新甲型H1N1及人季节性H1N1和H3N2流感病毒的单管多重荧光定量PCR方法

• 作者: 成艳辉 曲梅 王大燕 王淼 秦萌 聂凯 舒跃龙 赵翔 韩峰 马学军 黄芳
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 医学
• 关键词: 新甲型H1N1 实时定量PCR 多重检测
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 97-102
• 页数: 6页
• 分类号: R373.1
• 语种: 中文

摘要

本研究设计的一种4重荧光定量RT-PCR检测方法,以A型流感病毒各亚型的血凝素基因(HA)为检测靶标,实现了同时检测新甲型H1N1流感病毒、人季节性H1N1流感病毒和人季节性H3N2流感病毒.本法使用人细胞RNA酶P基因作为内参,以判断标本来源和实施质量控制.利用不同来源和哑型的流感病毒验证了该方法的特异性;利用连续稀释的新甲型H1N1流感病毒HA全基因体外转录物进行灵敏度分析.结果表明该方法灵敏度高,可检测低至20个拷贝的RNA;特异性强,每对引物只检测出对应的病毒,无交叉反应;并且成功地验证性检验了34份新甲型H1N1流感病毒阳性临床标本和20份人季节性H1N1和H3N2流感病毒及人乙型(HB)流感病毒阳性临床标本.因此,该多重荧光定量RT-PCR法是一种可同时检测2009年新甲型流感病毒及季节性流感病毒的有效方法.