重组人神经生长因子昆虫表达载体的构建及表达

• 作者: 周世力 李佳楠 韩诗
• 来源期刊: 江汉大学学报（自然科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: rhβ-NGF 杆状病毒载体 昆虫细胞表达
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 67-69,73
• 页数: 4页
• 分类号: R392.11
• 字数: 2322字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-0143.2010.01.018

摘要

目的:构建重组人神经生长因子(rhβ-NGF)杆状病毒表达载体,转染昆虫细胞从而获得目的蛋白的大量表达.方法:从人胎盘组织中提取细胞总RNA,采用RT-PCR方法扩增β-NGF基因片段,经BamHI、HindⅢ双酶切后插入杆状病毒表达载体pFastBacTMDual的多克隆位点处,构建出重组载体pFastBacTM-Dual+[rhβ-NGF].对构建的载体进行PCR和酶切鉴定并测序.采用脂质体转染方法将表达载体转入昆虫细胞系Sf9中,通过双抗夹心ELISA对rbβ-NGF的表达进行检测.结果:构建的rhβ-NGF基因插入正确且序列与GenBank一致.ELIsA检测结果显示病毒感染的Sf9细胞可表达rhβ-NGF.结论:成功构建出杆状病毒表达载体pFastBacTMDual+[rhβ-NGF],并在昆虫细胞系Sf9中得到表达,为大量制备重组人神经生长因子奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周世力	江汉大学生命科学学院生物技术系	48	681	10.0	25.0
2	李佳楠	江汉大学生命科学学院生物技术系	27	90	5.0	8.0
3	韩诗	江汉大学生命科学学院生物技术系	1	2	1.0	1.0