人外周血单核细胞来源的树突状细胞的体外诱导

• 作者: 彭卫斌 李瑜元 沙卫红 聂玉强
• 来源期刊: 实用医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 单核细胞 树突状细胞 细胞因子 体外培养
• 年，卷（期）: 2010,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1701-1704
• 分类号: R3
• 字数: 3356字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-5725.2010.10.013

摘要

目的:探讨在体外从人外周血单核细胞诱导培养成熟的树突状细胞(dendritic cell,DC)的方法.方法:培养过程分两阶段,第一阶段:采用密度梯度离心法分离健康成人外周血中的单个核细胞,再以黏附法分离出单核细胞,经重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)100 ng/mL、重组人白介素-4(rhIL-4)100 ng/mL体外诱导.第二阶段:第5天加入重组人肿瘤坏死因α-(rhTNF-α)100 ng/mL,继续培养2 d,刺激DC成熟.倒置显微镜下观察DC形态,流式细胞仪检测DC表面标志物CD83、CD1a、CD86、CD40、CD14表达水平,用MTT法测定DC刺激同种异体T细胞增殖的能力.结果:人外周血单核细胞经rhGM-CSF及rhIL-4诱导培养5 d后,多数细胞呈集落生长,细胞表型CD83、CD1a、CD86、CD40及CD14分别是14.3%、12.8%、20.1%、19.9%及16.2%.加入rhTNF-α诱导后,即培养第7天,细胞表型CD83、CD1a、CD86、CD40及CD14分别是29.8%、18.2%、33.6%、28.1%及8.0%(与第5天比较,均P<0.05).成熟后的DC具备较强刺激T细胞增殖的能力.结论:rhGM-CSF联合rhlL-4诱导人外周血单核细胞,可获得大量不成熟的DC,该体系有利于Dc扩增,加入rhTNF-α,继续培养2 d,可诱导出成熟的DC,成熟的DC具备较强刺激T细胞增殖的能力.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	聂玉强	广州市消化病重点实验室广州医学院附属广州市第一人民医院消化内科	9	119	4.0	9.0
2	李瑜元	广州市消化病重点实验室广州医学院附属广州市第一人民医院消化内科	5	106	3.0	5.0
3	沙卫红	广东省医学科学院广东省人民医院消化内科	14	78	6.0	8.0
4	彭卫斌	广州市消化病重点实验室广州医学院附属广州市第一人民医院消化内科	1	9	1.0	1.0