周细胞对缺氧诱导下视网膜微血管内皮细胞增生的影响

• 作者: 凌宇 惠延年 李冬 王应利 郭斌 郭纯刚
• 来源期刊: 眼科研究
• 学科: 医学
• 关键词: 周细胞 视网膜微血管内皮细胞 共培养 增生 缺氧
• 年，卷（期）: 2010,（12）
• 页码范围: 1144-1149
• 分类号: R774.1
• 字数: 5231字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-0808.2010.12.009

摘要

目的 探讨视网膜微血管内皮细胞(RMECs)与共培养的周细胞(PCs)及PCs条件培养液(PCM)对常氧和缺氧条件下RMECs增生的影响.方法 传代培养大鼠RMECs和PCs,采用兔抗鼠Ⅷ因子多克隆抗体和小鼠抗大鼠CD31单克隆抗体免疫组织化学法鉴定RMECs,PCs采用小鼠抗大鼠desmin多克隆抗体和兔抗鼠抗血小板衍生生长因子受体-β(PDGFR-β)进行免疫荧光双标鉴定.Millicell小室建立PCs和RMECs共培养系统,PCs培养近融合期后制备PCM,向共培养系统或PCM中加入终浓度为200μmol/L的CoCl2诱导形成细胞化学缺氧模型,观察常氧和缺氧条件下PCs和PCM对RMECs增生的影响.使用MTT法、3H-TdR掺入法检测RMECs在不同培养条件下的增生数量,并用流式细胞仪检测RMECs在不同细胞周期的细胞率.结果 近融合期的RMECs呈类纺锤状、单层生长,可见明显的接触抑制,Ⅷ因子和CD31均阳性表达.PCs形状不规则,细胞重叠生长无接触抑制,PDGFR-β和desmin抗体双标阳性.缺氧3～9d缺氧RMECs单独培养组较常氧RMECs单独培养组各时间点的RMECs均明显增生,缺氧6d时增生达高峰(P＜0.01),细胞生长抑制率(GIR)为-24.9%.缺氧共培养组较缺氧RMECs单独培养组RMECs增生下降(P＜0.05).缺氧3、6、9d时常氧共培养组较常氧RMECs单独培养组RMECs数目均明显下降(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.01).缺氧6d时S期RMECs数量明显增加,占各期细胞总数的(43.9±0.8)%;常氧或缺氧共培养组,PCs均可抑制RMECs的增生,S期细胞分别占各期细胞总数的(3.6±0.1)%、(15.1±0.9)%(P＜0.05,P＜ 0.01).常氧PCM组RMECs的吸光度(A)值和3H-TdR掺入量4～24h均低于对照组(P＜0.05).结论 缺氧和常氧条件下RMECs和PCs共培养时PCs均可抑制RMECs的增生,常氧条件下PCM可抑制RMECs的增生.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	惠延年	第四军医大学西京医院眼科	196	1070	14.0	19.0
2	王应利	煤炭总医院眼科	10	35	3.0	5.0
3	郭斌	解放军第81医院眼科	24	68	5.0	6.0
4	李冬	煤炭总医院眼科	5	14	2.0	3.0
5	凌宇	煤炭总医院眼科	4	7	1.0	2.0
6	郭纯刚	煤炭总医院眼科	2	1	1.0	1.0