骨髓间质干细胞体外定向诱导分化为软骨细胞的实验研究

• 作者: 同志勤 同志超 李毅 杨团民 杨镇 王坤正 石宗利 郭雄
• 来源期刊: 美中国际创伤杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 骨髓间充质干细胞 诱导 软骨细胞 组织工程
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 15-18
• 页数: 4页
• 分类号: R318
• 语种: 中文

摘要

目的:探讨分离骨髓间充质干细胞(MSCs)并诱导其向软骨细胞转化的体外培养方法,为软骨组织工程的种子细胞来源提供实验依据.方法:抽取兔髂骨骨髓液,经梯度离心法和贴壁法进行体外培养,贴壁细胞传代,取第3代细胞在培养基中添加软骨分化诱导剂[含转化生长因子(TGF-β2)10ng/ml、地塞米松10-7mol/L、维生素C50μmol/L,经7、14、21d诱导培养后,倒置显微镜观察细胞形态,免疫组织化学染色检测软骨特异性Ⅱ型胶原表达.将诱导细胞与软骨支架材料-聚磷酸钙纤维/左旋聚乳酸(CPP/PLLA)复合,1周后终止培养,扫描电镜观察细胞黏附情况.结果:诱导后细胞体外扩增能力显著降低,细胞形态由成纤维样梭形向多角形、多边形或类圆形转变,诱导21d后细胞形态变化最为显著,Ⅱ型胶原免疫组化染色深而均匀.诱导后的MSCs可在支架材料内良好黏附生长.结论:体外培养的MSCs可定向诱导分化为软骨细胞,分泌软骨细胞特异性基质,可用作软骨组织工程的种子细胞.