酿酒酵母HOR2基因缺失突变株的构建

• 作者: 林晓华 王艳尊 陈永金 雷娟娟 黄建忠
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 酿酒酵母 HOR2基因 基因敲除 乙醇 甘油
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 6-8
• 分类号: Q785
• 字数: 2882字
• 语种: 中文

摘要

目的:构建酿酒酵母HOR2基因缺失的突变株并研究其对甘油和乙醇产造的影响.方法:以PCR为基础,通过同源重组的方式使目的基因缺失.结果:通过设计含有与HOR2(GPP2)基因两侧序列同源的长引物,以质粒PUG6为模板进行PCR构建含有Cre/loxP系统的酿酒酵母HOR2基因敲除组件,转化酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)YS,获得为loxP-kan-loxP序列组件所替换而产生kan'的阳性克隆子.然后再将质粒PSH65转入阳性克隆子诱导表达Cre酶切除筛选标记,在原ORF基因处保留一个loxP位点,丢失质粒后获得HOR2单倍体缺陷型菌株.重复转化敲除组件实现另一条等位基因的敲除.发酵实验表明,突变株甘油产量降低3.34%,乙醇产量提高1.96%.结论:成功获得了酿酒酵母HOR2基因缺失的突变株,并命名为YS_2-HOR2.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈永金		1	5	1.0	1.0
2	林晓华		1	5	1.0	1.0
3	王艳尊		1	5	1.0	1.0
4	雷娟娟		1	5	1.0	1.0