摘要:
目的:观察复方芪麝片(FFQSP)对直立体位大鼠腰椎骨形成的作用,探讨可能的作用机制.方法:90只SD大鼠随机分为三大组,正常组不进行处理,普通饲养笼喂养;模型组和FFQSP组,建立长期直立体位大鼠模型.每大组再随机分为5、7和9个月组,FFQSP组分别在造模后4、6、8个月开始应用FFQSP(将片剂研磨溶于生理盐水)灌胃,连续灌胃1个月;模型组和正常组用同量生理盐水灌胃1个月.所有动物于相应时间点取整个腰椎进行检测,行L5椎体藏红-固绿染色及Ⅰ型胶原(type Ⅰ collegan,ColⅠ)免疫组织化学染色,余下腰椎椎体应用实时荧光定量聚合酶链反应(real time reverse transcription polymerass chain reaction,real time RT-PCR)技术检测Ⅰ型胶原α2(type Ⅰ collegan α2,Col1α2)、转化生长因子beta1(transform growth factor beta1,TGF-β1)和runt相关转录因子2(runt-related transcription factor2,Runx2)基因的表达.结果:藏红染色显示,与正常组比较,三个时间点模型组及FFQSP组椎体骨小梁均增加,FFQSP组在5个月和7个月时较模型组略有增加;在9个月时较模型组略有减少.ColⅠ免疫组织化学染色显示三个时期模型组骨小梁阳性染色数目较正常组均增加,FFQSP组骨小梁阳性染色范围较正常组、模型组均增加.Real time RT-PCR示,与模型组比,5个月FFQSP组Col1α2、TGF-β1基因表达显著下调(P<0.05,P<0.01),与正常组比,仅上调Runx2的表达(P<0.01).7个月FFQSP组Col1α2、TGF-β1、Runx2基因表达较正常组和模型组都显著上调.9个月FFQSP组与模型组比较,Col1α2基因表达显著下调(P<0.05),而TGF-β1和Runx2基因表达均显著上调(P<0.05);与正常组比,三个基因表达均显著上调(P<0.01).结论:复方芪麝片对直立大鼠的椎体成骨有增强作用,以中后期( 7个月、9个月)效应显著,其疗效可能与TGF-β1基因水平的上调有关.