TDG蛋白的表达纯化及多克隆抗体的制备

• 作者: 兰燕 华子春 唐波 李石营
• 来源期刊: 东南大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 胸腺嘧啶糖苷酶 原核表达 纯化 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 页码范围: 485-489
• 分类号: Q51|R392.11
• 字数: 4091字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6264.2010.05.002

摘要

目的:表达纯化胸腺嘧啶糖苷酶(TDG)蛋白并制备TDG多克隆抗体.方法:PCR扩增小鼠TDG(mTDG)的基因片段并插入pET28a(+)原核表达载体,表达并纯化His-mTDG融合蛋白.用纯化的His-mTDG蛋白免疫兔子产生抗血清,进一步亲和纯化抗血清制备抗TDG的多克隆抗体,并检测分析制备的抗体在Western blotting和免疫荧光分析中的应用.结果:在低温(20 ℃)和低IPTG浓度(0.2 mmol·L-1)时,His-mTDG融合蛋白大部分在可溶上清部分,用亲和层析法分离纯化了His-mTDG蛋白,并用纯化的蛋白制备了兔抗TDG抗体,结果显示制备的抗体能够特异性地在免疫分析中使用.结论:本研究纯化了条带单一的并且具有生物学活性的TDG融合蛋白,制备了具有良好特异性的兔抗TDG抗体,为进一步研究TDG的性质、结构和功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	华子春	南京大学医药生物技术国家重点实验室	125	473	11.0	17.0
2	唐波	南京大学医药生物技术国家重点实验室	2	14	1.0	2.0
3	李石营	南京大学医药生物技术国家重点实验室	1	1	1.0	1.0
4	兰燕	南京大学医药生物技术国家重点实验室	2	1	1.0	1.0