牛病毒性腹泻病毒RT-PCR检测方法的建立及应用

• 作者: 刘爽 吴发兴 孟雨 张志 张燕霞 朱紫祥 李晓成 王晶钰
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 牛病毒性腹泻病毒 5'UTR基因 反转录聚合酶链反应 检测
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 51-54
• 页数: 4页
• 分类号: S852.659.6
• 语种: 中文

摘要

根据GenBank中登录的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)5'UTR基因序列,设计合成了1对特异性引物,建立了检测BVDV 218 bp片段的RT-PCR方法.通过对该方法的特异性、敏感性和重复性进行试验,结果显示,该方法从BVDV标准毒株Oregon C_(24)V中扩增出了218 bp的特异性片段,而对猪瘟病毒、蓝舌病病毒、牛传染性鼻气管炎病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病病毒、MDBK正常细胞的扩增结果均为阴性.经对标准毒株的细胞毒进行检测,其敏感度达10~(-1) TCID_(50).不同人员用该方法进行检测,结果均一致,表明其重复性好.应用该方法对70份临床疑似发病猪样品进行检测,结果检出11份阳性,阳性检出率约为15.7%.在对5份细胞培养用犊牛血清的检测中,亦检出2份阳性.表明,建立的RT-PCR方法具有特异、灵敏、高效、快速的特点,可用于BVDV的临床检测及流行病学监测.