外源性FGF9对体外肺泡Ⅱ型上皮细胞作用的实验研究

• 作者: 侯生才 李辉 李远青 田永彦 胡滨 苗劲柏
• 来源期刊: 军事医学科学院院刊
• 学科: 生物学
• 关键词: 肺泡Ⅱ型上皮细胞 原代培养 成纤维细胞生长因子9 细胞存活率
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 页码范围: 573-575
• 分类号: Q253
• 字数: 2494字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9960.2010.06.021

摘要

目的 观察外源性成纤维细胞生长因子9(fibroblast growth factor 9,FGF9)对体外大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(ATⅡ细胞)生长的影响.方法 体外原代分离、纯化、培养成年大鼠ATⅡ细胞,锥虫(台盼)蓝拒染法测定细胞活力,透射电镜鉴定细胞,碱性磷酸酶(AKP)染色法确定细胞纯度.实验组分别用10,30,50 ng/ml FGF9和200 μg/ml肝素处理细胞24 h,对照组为未经药物处理的ATⅡ细胞.选择30 ng/ml FGF9浓度后,再通过噻唑蓝检测法(MTT法)分别检测24,48,72和96 h的细胞存活率.结果 原代培养ATⅡ细胞的产量约为2×107个/鼠,细胞活力＞90%,电镜下观察到ATⅡ细胞典型细胞结构--板层小体,细胞纯度>90%.采用30和50 ng/ml浓度FGF9刺激细胞24 h,ATⅡ细胞存活率明显增高(P<0.01).采用30 ng/ml FGF9刺激ATⅡ细胞不同时间(24,48,72和96 h)发现,24,48,72和96 h细胞存活率均明显高于对照组(P均<0.01). 结论 利用弹性蛋白酶消化分离和大鼠IgG免疫黏附纯化,可获得高产量、高纯度及高活力的原代ATⅡ细胞.FGF9以浓度和时间依赖的方式促进ATⅡ细胞增殖.