黑曲霉水解京尼平苷β-葡萄糖苷酶的分离纯化及其酶学性质

• 作者: 李江 梁华正 王剑锋 陈今朝 饶军
• 来源期刊: 菌物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 同工酶 乙醇沉淀 对硝基苯-β-D吡喃葡萄糖苷 京尼平
• 年，卷（期）: 2010,（5）
• 页码范围: 683-690
• 分类号: Q93
• 语种: 中文

摘要

黑曲霉Aspergillus niger发酵豆渣产β-葡萄糖苷酶(BGL).粗酶液依次经过乙醇沉淀和DEAE-Sepharose Fast Flow 离子交换层析,获得了两种电泳纯的β-葡萄糖苷酶BGLl和BGL2,它们的相对分子质量分别为102kDa、97kDa,总酶活回收率达到48%.在pH 2.5及温度为55℃时,两种BGL水解京尼平苷的速度均达到最大;BGL水解活性受到Na+的激活但不受K+的影响,但Mg2+、Ba2+、Cu2+、Fe2+、Zn2+和Hg+等离子对BGL活性有不同程度的抑制作用(其中对BGLl的抑制普遍强于BGL2),而且同一种离子对不同BGL活性的影响性质不同,Ca2+显著激活BGL1而对BGL2无影响,Fe3+显著抑制BGL1而激活BGL2.在同样条件下,BGL对对硝基苯-β-D吡喃葡萄糖苷(pNPGlu)、对硝基苯-β-D吡喃半乳糖苷(pNPGal)和水杨苷均有催化活性,其中对pNPGlu的Km值最小,BGL1、BGL2分别为0.764和1.934mmol/L;而BGL对京尼平苷水解的催化效率最高,BGL1、BGL2的Kcat/Km值分别为4.28×104和1.04×105L/mol·s.BGL1、BGL2活性的pH稳定范围相近,分别为pH2.0-7.0、pH2.0-8.5,但它们的热稳定性差异较大,55℃时BGL2保温60min,酶活保留了60%,而BGL1的酶活半衰期只有10min.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	饶军	东华理工大学生物系	73	470	12.0	17.0
2	梁华正	东华理工大学生物系	52	577	13.0	22.0
3	陈今朝	长江师范学院生物系	63	336	10.0	15.0
4	李江	东华理工大学生物系	49	381	13.0	17.0
5	王剑锋	东华理工大学生物系	15	84	6.0	9.0