鼠骨髓间充质干细胞的分离培养及定向诱导分化为内皮样细胞

• 作者: 蔡绍皙 赵瑛
• 来源期刊: 中国应用生理学杂志
• 学科: 哲学
• 关键词: 大鼠骨髓间充质干细胞 内皮样细胞 分离 培养 分化 特征 鉴定
• 年，卷（期）: 2010,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 60-65
• 页数: 6页
• 分类号: B394.2
• 字数: 5614字
• 语种: 中文

摘要

目的:探讨体外大鼠骨髓间充质干细胞(rBMMSCs)的分离培养和血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对其定向诱导为内皮样细胞(ELCs)的可行性.方法:采用Percoll(1.073g/ml)分离液分离骨髓单个核细胞,用含10%胎牛血清(FBS)的LG-DMEM培养基贴壁纯化培养,倒置显微镜、免疫细胞化学法、流式细胞仪、MTT法、透射电镜(TEM)联合对rBMMSCs形态、表型、生长曲线、细胞周期以及超微结构进行鉴定;诱导后的细胞,采用倒置显微镜观察细胞形态,免疫细胞化学法检测CD31、CD144(VE-cadherin)和CD34表达以及摄取Dil-acLDL、结合FTIV-UEA-1的功能特点.结果:rBMMSCs呈长梭形,漩涡状排列.细胞生长曲线显示潜伏期、对数生长期和平台期,符合干细胞的生长规律.透射电镜结果表明:rBMMSCs有两种不同的形态结构,其中体积较小、核质比大、胞质内细胞器稀少者为处于未分化或分化较低状态的幼稚型rBMMSCs.细胞周期分析显示:第4代细胞CO/Gl期为95.67%,表明绝大部分细胞处于非增殖状态;诱导后的部分细胞形态可见类似ELCs改变,表达血管内皮细胞(ECs)特异性表面标志CD31、CD34和(3)144,具有摄取Dil-ac-LDL以及结合FITC-UEA-1的功能特点.结论:采用Percell密度梯度离心与贴壁培养相结合的方法所培养的rBMMSCs在体外具有定向诱导分化为ELCs的潜能,可能成为血管组织工程理想的种子细胞来源.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蔡绍皙	重庆大学生物工程学院	220	1766	19.0	32.0
2	赵瑛	重庆大学生物工程学院	4	22	3.0	4.0